59水葫芦链格孢生长因子
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59水葫芦链格孢生长因子
（）：２０１１，４０１１７６８０河南农业科学，－；ｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ；几个主要因子对水葫芦链格孢生长和侵染力的影响；胡丽，谭万忠＊，殷利利，刘佳，罗华东；（）西南大学植物保护学院，重庆４００７１６；摘要：测试引起水葫芦黑斑病的生防真菌水葫芦链格孢；个／皿；都有很大的影响；保湿处理时间设定为０～４保湿１感７．７７；８ｈ，；））病率
（）：２０１１，４０１１７６８０　河南农业科学，－ｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ　Ｊ　　　　ｇ几个主要因子对水葫芦链格孢生长和侵染力的影响胡　丽，谭万忠＊，殷利利，刘　佳，罗华东（）西南大学植物保护学院，重庆４００７１６摘要：测试引起水葫芦黑斑病的生防真菌水葫芦链格孢（的主要生物学特Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ）　性（培养基、温度、和影响该菌株侵染力的３个主要因Ｈ值对菌落生长以及光照对产孢量的影响）ｐ，子（接种温度、光照、保湿时间）以期为该菌的大量发酵和真菌除草剂的研制奠定基础。试验结果表明，培养基、温度和酸碱度是影响该菌生长的主要因素，其最佳培养基、温度和酸碱度分别是马铃，培养薯蔗糖培养基、Ｈ值９２５℃和ｐ．０。最适合该菌产孢的光照条件是近紫外光（１２ｈ光／１２ｈ暗）５个／皿。在室内控制条件下测定，温度、湿度和光照对菌株的致病力２０ｄ后产孢量达到３．４４×１０都有很大的影响。３０℃处理的原生叶片的病害严重度明显高于２０℃和２５℃２个处理，２１ｄ时达到保湿处理时间设定为０～４保湿１感７．７７；８ｈ，２ｈ时，４周后水葫芦叶片平均病害严重度达到５．２１，））病率达到９且发病速度较快；弱光照处理（的叶片病害严重度较强光照处理（５％，１２００ｌｘ３０００ｌｘ　　的严重度级数高，因此，在一定程度上强光照对菌丝的侵染有抑制作用。关键词：水葫芦；黑斑病；链格孢菌；培养条件；真菌生长；产孢量；致病性（）中图分类号：Ｓ４５１　Ｓ４７６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４３２６８２０１１１１００７６０５－－－ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＳｏｍｅＭａｏｒＦａｃｔｏｒｓｏｎＧｒｏｗｔｈａｎｄＰａｔｈｏｅｎｉｃｉｔｏｆ　　　　　　　　ｊｇｙ　ＡｌｔｅｒｎａｉａｔｅｎｕｉｓｓｉｍａＣａｕｓｉｎＢｌａｃｋＳｏｔｏｆＷａｔｅｒＨａｃｉｎｔｈ　　　　　　ｇｐｙ　＊，，，，ＨＵＬｉＴＡＮ　ＷａｎｚｈｏｎＹＩＮＬｉｌｉＬＩＵＪｉａＬＵＯ　Ｈｕａｄｏｎ　－　－　－ｇｇ（，，）ＣｏｌｌｅｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔＣｈｏｎｉｎ４００７１６，Ｃｈｉｎａ　　　　ｇｙｇｑｇ　：（，ＡｂｓｔｒａｃｔＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｅｖｅｒａｌｍａｏｒｆａｃｔｏｒｓｏｎｒｏｗｔｈｍｅｄｉｕｍ，ｔｅｍｅｒａｔｕｒｅａｎｄＨ）ｓｏｒｕｌａ　　　　　　　　　－ｊｇｐｐｐ（），）ａｔｈｏｅｎｉｃｉｔｔｉｏｎｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｔｅｍｅｒａｔｕｒｅｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｍｏｉｓｔｕｒｅｔｉｍｅｏｆ　　　　　ｐｇｙ（ｐＡｌｔｅｒｎａｒｉａｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ，ａｂｉｏｌｏｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌａｅｎｔｆｏｒｗａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈ，ｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉａｔｅｄｉｎｔｈｅｒｅｓ　　　　　　　　　　　－ｇｇｙｇｐ，ｅｎｔｓｔｕｄ．Ｅｘｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｅｓｔｍｅｄｉｕｍ，ｔｅｍｅｒａｔｕｒｅａｎｄＨ　ｗｅｒｅｒｅｓｅｃ　　　　　　　　　－ｙｐｐｐｐ／）ｔｉｖｅｌＰＳＡ，２５℃ａｎｄＨ９．０ｆｏｒｔｈｅｆｕｎｕｓｒｏｗｔｈ．ＵＶｌｉｈｔ（１２ｈｄｗａｓｔｈｅｍｏｓｔａｒｏｒｉａｔｅ　　　　　　　　　ｙ，ｐｇｇｇｐｐｐ５，ｆｏｒｉｔｓｓｏｒｕｌａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｓｏｒｅｒｅａｃｈｅｄ３．４４×１０　ｐｄｉｓｈａｆｔｅｒ２０ｄａｓ．Ｔｅｍｅｒａｒｏｄｕｃｔｉｏｎｅｒ　　　　　　　　　　－ｐｐｙｐｐ，ｔｕｒｅｌｉｈｔｉｎｔｅｎｓｉｔａｎｄｍｏｉｓｔｕｒｅｗｅｒｅｓｈｏｗｎｍａｒｋｅｄｉｍａｃｔｓｏｎｃｏｎｉｄｉａｌｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｉｎｆｅｃ　　　　　　　　　　　－ｇｙｐｇ　ｔｉｏｎｏｆｔｈｅｆｕｎｕｓ．Ｔｈｅｈｉｈｅｓｔｄｉｓｅａｓｅｉｎｔｅｎｓｉｔｏｎｔｈｅｒｉｍａｒｌｅａｖｅｓａｔ２１ｄａｓａｆｔｅｒｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　　　　　　　　　　　　ｇｇｙｐｙｙ　　ａｎｄｉｎｃｕｂａｔｉｏｎａｔ３０℃ｒｅａｃｈｅｄ７．７７，ｏｂｖｉｏｕｓｌｈｉｈｅｒｔｈａｎａｔ２０℃ａｎｄ２５℃．Ｍｏｉｓｔｕｒｅｄｕｒａｔｉｏｎ　　　　　　　　　ｙｇ　ｗａｓｓｈｏｗｎａｎｉｍｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒａｆｆｅｃｔｉｎｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｏｆｔｈｅａｔｈｏｅｎ．９５％ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｌｅａｖｅｓｗｅｒｅ　　　　　　　　　ｐｇｙｐｇ　　ｉｎｆｅｃｔｅｄａｎｄｄｉｓｅａｓｅｄａｆｔｅｒ４ｗｅｅｋｓｗｈｅｎｔｈｅｗｅｒｅｍａｉｎｔａｉｎｅｄｆｏｒｍｏｒｅｔｈａｎ１２ｈｏｕｒｓｏｆｗｅｔｎｅｓｓ　　　　　　　　　　　　　ｙ　）ａｔ２５℃，ａｎｄｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｓｅｖｅｒｉｔｒｅａｃｈｅｄ５．２１．Ｈｉｈｌｉｈｔｉｎｔｅｎｓｉｔ３０００ｌｘｓｈｏｗｅｄｍａｒｋｅｄｉｎｈ　　　　　　　　　　－ｙｇｇｙ（　ｉｂｉｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｎｃｏｎｉｄｉａｌａｎｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｎｄｔｈｕｓｒｅｓｕｌｔｅｄｉｎｌｏｗｅｒｄｉｓｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｔｈｏｅｎ　　　　　　　　　　　　　　　－ｇｐｇ（）ｌａｎｔｓ．ｅａｓｅｓｅｖｅｒｉｔｔｈａｎｌｏｗｌｉｈｔｉｎｔｅｎｓｉｔ１２００ｌｘｏｎｔｈｅ　　　　　　　ｐｙｇｙ　：Ｗ；Ａ；ＦＫｅｗｏｒｄｓａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈ；Ｂｌａｃｋｓｏｔｌｔｅｒｎａｒｉａｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ；Ｃｕｌｔｕｒａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｕｎａｌ　　　　ｙｐｇｙ　；ＳｏｒｕｌａｔｉｏｎＰａｔｈｏｅｎｉｃｖｉｔｒｏｗｔｈ；ｐｇｙｇ收稿日期：２０１１０６０１－－）基金项目：国家公益性行业专项（２０１１０３０２７，：作者简介：胡　丽（女，四川江油人，在读硕士研究生，研究方向：病原真菌学。Ｅ－ｍ１９８５ａｉｌｈｕｌｉｋ２００９＠１２６．ｃｏｍ－）ｙｊｙ，：谭万忠（男，重庆人，教授，主要从事外来入侵生物等领域的研究。Ｅ－ｍ１９５５ａｉｌｄｒｗｚｔａｎ２６．ｃｏｍ＊通讯作者：－）＠１几个主要因子对水葫芦链格孢生长和侵染力的影响１期　　　　　　　胡　丽等：　第１?７７?为雨久花科Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｅｓ）　　水葫芦（　ｐ（）凤眼莲属（漂ＰｏｎｔｅｄｅｒｉａｃｅａｅＥｉｃｈｈｏｒｎｉａ　Ｋｕｎｔｈ）浮水生植物，是世界十大害草和我国重要的外来入１］。目前，侵植物之一［水葫芦主要通过人工机械、化２］。但人工打捞只能在学农药和生物防治方法防除［，煮沸后加水定容至１１０００００ｍＬ；　⑧ｇ和琼脂粉２ｇ：水葫芦马铃薯葡萄糖培养基）水葫芦植ＷＬＰＤＡ（，，株１去皮马铃薯１加水煮烂，捣汁过滤后００００ｇｇ，加葡萄糖１煮沸后加水定容至００ｇ和琼脂粉２ｇ：马铃薯胡萝卜培养基）马铃薯２１０００ｍＬ；ＣＡ（０　⑨Ｐ，加适量水煮烂，捣汁过滤，加琼脂０ｇ和胡萝卜２ｇ，煮沸后加水定容至１粉２００００ｍＬ。所有培养基　ｇ，均用ＮａＯＨ或ＨＣｌ溶液调节至中性（Ｈ值７．０）ｐ／皿）并倒入９约５ｍ制成平板培养基ｃｍ培养皿（Ｌ备用。１．２　试验方法１．２．１　水葫芦链格孢主要培养特性测试１．２．１．１　培养基试验　在２５℃恒温培养５ｄ的水葫芦链格孢菌落上，用打孔器沿菌落边缘打取直径为４．接于ＷＡ、０ｍｍ的菌饼，ＣＡＡ、ＰＳＡ、ＰＤＡ、ＷＬＡ、ＯＳＡ、ＷＬＰＤＡ和ＷＬＰＳＡ培养基平板中央。每种培养基处理重复５次，于２５℃培养箱中培养用垂直十字法逐日测量记载菌落直径。５ｄ后，１．２．１．２　温度试验　在２５℃恒温培养５ｄ的菌落用打孔器沿菌落边缘打取直径为４．上，０ｍｍ的菌饼，置于Ｐ分别于５℃、ＤＡ培养基平板中央，１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃、４０℃（±０．５℃）８个温度条件下培养，每个温度处理重复５次，连续观察，用垂直十字法逐日测量菌落直径并记录数据。５ｄ共１．２．１．３　酸碱度试验　试验采用ＰＤＡ培养基，／设置１１个酸碱度处理。用１．０ｍｏｌＬ的ＮａＯＨ和ＨＣｌ溶液将培养基的ｐ．０、５．０、Ｈ值分别调节到４每６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、９．０、１０．０、１１．０和１２．０，个处理重复５次。将菌饼置于２５℃培养箱中培养，，连续观察５用垂直十字法逐日测量菌落直径并记ｄ录数据。１．２．１．４　光照对产孢量的影响试验　在２５℃恒温箱中培养５用打孔器沿菌落边缘打取ｄ的菌落上，直径为４置于Ｐ分别．０ｍｍ的菌饼，ＣＡ平板中央，、在近４和０Ｗ紫外灯（ＮＵＶ）３０００ｌｘ日光灯（ＤＬ）　，黑暗条件下连续培养２每个处理重复５次。第０ｄ用盖玻２０天在每皿培养基上加入１ｍＬ的灭菌水，片轻刮培养基表面。将孢子悬液用０．１６５ｍｍ的网筛过滤后，滴于血球计数板上，在１０×２０倍显微镜下计数，计算孢子浓度。１．２．２　３个主要因子对水葫芦链格孢侵染力的影响试验分设２１．２．２．１　温度试验　在人工气候箱中，０℃、光照强２５℃和３０℃（±０．５℃）３个温度梯度处理，。按菌丝湿质量与无菌水１∶１度设定为３０００ｌｘ００　短时间、小范围内起作用，而且费时费力。机械搅灭受地域限制，成本高，不适合推广，而且打捞的水葫蚊虫滋生，也会严重影响环境和人芦若不及时处理，畜健康。化学除草不仅费用高，而且可能直接造成环境污染。因此，近年来应用植物病菌控制水葫芦的生物防治研究受到人们的高度关注。国外报道了［］其中有７种强致病菌７０多种水葫芦致病真菌３－５，株具有开发成水葫芦真菌除草剂的生防应用潜力，罗得曼尼尾孢（防除水葫芦已Ｃｅｒｃｏｓｏｒａｒｏｄｍａｎｉｉ）　ｐ］６］６８－。我国已报道了６种致病真菌［，获专利保护［其――水葫芦链格中殷利利等报道的水葫芦黑斑病菌―［９］孢（对水葫芦有很强的致病Ａｌｔｅｒｎａｉａｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ）　性，其致病机制主要在于产生除草活性的毒素，因而在水葫芦的生物控制中具有潜在的应用价值。本试验研究了温度等几个主要因子对该病菌生长和致病以期为病菌的大量发酵和真菌除草剂的性的影响，研制奠定基础。１　材料和方法１．１　试验材料供试菌株：水葫芦链格孢（Ａ．ｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ）ＷＨ２６Ｂ菌株由西南大学真菌病害研究室分离获得，经单孢纯化培养后移入ＰＳＡ培养基试管斜面，使用前移入新平板培养基上培养活化。４℃保存，供试培养基及其配方：水葫芦叶片培Ａ（①ＷＬ：，养基）水葫芦叶片２加适量水煮烂捣碎，滤去００ｇ，残渣，加入琼脂粉２煮沸并定容至１００００ｍＬ；　②ｇ：，马铃薯葡萄糖培养基）去皮马铃薯２加ＰＤＡ（００ｇ，适量水煮烂，过滤后加入葡萄糖２００ｇ和琼脂粉２ｇ煮沸并定容至１马铃薯蔗糖培养０００ｍＬ；ＳＡ（　③Ｐ：，基）去皮马铃薯２加适量水煮烂，过滤后加入００ｇ，煮沸后加水定容至蔗糖２００ｇ和琼脂粉２ｇ：，胡萝卜培养基）胡萝卜２加１０００ｍＬ；ＡＡ（００　④Ｃｇ，过滤后加入琼脂粉２煮沸并定容至适量水煮烂，０ｇ：，清水洋菜培养基）琼脂粉２加１０００ｍＬ；０　⑤ＷＡ（ｇ：燕麦片培养基）水煮沸并定容至１０００ｍＬ；ＳＡ（　⑥Ｏ，燕麦片３加水煮烂，过滤后加蔗糖１００ｇｇ和琼脂粉，煮沸后加水定容至１水葫２００００ｍＬ；ＰＳＡ（　⑦ＷＬｇ：，芦马铃薯蔗糖培养基）水葫芦植株１去皮马铃００ｇ，薯１加适量水煮烂捣碎，滤去残渣，加入蔗糖００ｇ?７８?的比例混合，充分搅拌配制成菌丝片断悬浮液。接种前，用无菌水将水葫芦叶片冲洗干净。采用涂抹法接种，用无菌毛刷将菌丝悬液均匀地涂抹于水葫芦叶片上，至叶片上菌丝液开始下滴为止。以无菌水涂抹的水葫芦叶片作为对照。每个温度下处理５，株植株（即５次重复）每株接种原生叶片和新生叶片５～６片。接种后，用塑料袋套在水葫芦上保持高湿度，４８ｈ后移去塑料袋。接种后每隔７ｄ观察记录叶片感病率，测定病害严重度。）１．２．２．２　光照试验　在ＲＨ７５％的（２５±０．５℃恒温保湿室中，光照强度设１２００ｌｘ和３０００ｌｘ２个处　　　理。每个光照下处理５株植株，每株接种原生叶片观察记录方法同上。和新生叶片５～６片。接种、１．２．２．３　保湿时间试验　将接种后的水葫芦用塑料袋分别保湿０、之后移至（１２、２４、３２、４８ｈ，２５±）光照强度３０．５℃、ＲＨ７０％、０００ｌｘ的生长箱中培　每个保湿时间处理５株水葫芦，每株接种原生叶养，片和新生叶片５～６片。接种、观察记录方法同上。１．２．３　病害严重度记载和数据处理　用求积仪测定叶片面积的大小，再测定叶斑面积的总和，则发病面积百分率等于叶斑面积与叶片面积的比值。根据参照Ｆ的病所得值，ｒｅｅｍａｎ和Ｃｈａｒｕｄａｔｔａｎ（１９８４）１０］（害分级标准［表１）观察记载病情，并计算对应病害严重度和平均严重度。病害严重度＝∑（接种叶／接种叶片数，片病害严重度）叶片平均病害严重／叶片总数。度＝∑（叶片病害严重度）将各项试验记录数据分别录入相应的数据文件，用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＥｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ１２．０软件计算各处　　理的平均数和标准差，并进行统计分析比较和作图。表１　Ｆｒｅｅｍａｎ和Ｃｈａｒｕｄａｔｔａｎ的病害严重度分级标准病害严重度级数０１２３４５６７８９病症茎部及叶片均无病斑叶片上１～４个病斑，茎部无病斑叶斑面积小于２茎部无病斑５％，叶斑面积小于５茎部无病斑０％，叶斑面积小于５叶尖死亡，茎部有病斑０％，叶斑面积小于５茎部有病斑０％，１０％的叶尖死亡，叶斑面积小于７茎部有病斑５％，３０％的叶尖死亡，叶斑面积７５％以上，６０％的叶片死亡叶片死亡，茎部仍是绿色，但有严重病斑叶片和茎死亡河南农业科学第４０卷　主要表现在菌落生长的快慢和菌丝的疏密不同。在供试的８种培养基上，该菌都能正常生长，除ＷＬＰＳＡ和其他培养基之间均存在极ＷＬＰＤＡ之间无差异外，。Ｐ显著差异（在Ｐ＜０．０１）ＳＡ最适宜该菌生长，每天平２５℃下培养５ｄ后菌落直径达到７０．１ｍｍ，菌丝致密，明显优于其他培养基；均增长达１４ｍｍ，在ＷＡ培养基上，菌落生长最缓慢，且菌丝较为稀疏，培养５ｄ后菌落直径仅为４２．７ｍｍ。数据为５次试验测定的平均值，不同字母表示）。图２同邓肯氏新复极差检验结果极显著（Ｐ＜０．０１图１　在不同培养基上培养５ｄ后水葫芦链格孢的菌落直径２．１．２　温度对水葫芦链格孢菌落生长的影响　图各种温度下菌落的平均生长率有明显的差２表明，温度是影响菌株生长的重要因子。菌株在１异，０～但生长的适温范围是２３５℃都能生长，５～３０℃。在菌落平均生长直径最大，为２５℃条件下培养，／。３此时其生长速率为１７０．０ｍｍ，４ｍｍｄ０℃时菌落生长直径为６９．５ｍｍ。２５℃和３０℃处理与其他处理差异均极显著，而２５℃和３０℃之间无极显著差异。２５℃处理下的菌落生长直径分别是１０℃、这些结果１５℃、２０℃处理的５．１２、１．８３和１．４７倍，说明，水葫芦链格孢生长的最适温度为２５℃。在菌落不能生长，其生长速率几乎为０；５℃和４０℃下，３５℃时生长极缓慢。２　结果与分析２．１　水葫芦链格孢的主要培养特性２．１．１　培养基对水葫芦链格孢菌落生长的影响　，不同种类培养基对菌落生长影响非常显著（图１）图２　不同温度下培养５ｄ后水葫芦链格孢的菌落直径几个主要因子对水葫芦链格孢生长和侵染力的影响１期　　　　　　　胡　丽等：　第１?７９?２．１．３　ｐＨ值对水葫芦链格孢菌落生长的影响　在ｐ水葫芦链格孢均能Ｈ值４．０～１２．０的范围内，。ｐ生长（图３）．５～１０．０适宜该菌的生长，Ｈ值６且处理之间差异不显著，其中该菌最佳生长ｐＨ值培养５极酸与极是９．０，ｄ后菌落直径达７４．５ｍｍ；当ｐ碱的条件对该菌生长具有很大的影响，Ｈ值菌落生长明显较缓慢，直径分别为４．０和１２．０时，与其他处理之间均存在显著３３．１ｍｍ和６２．３ｍｍ，）。差异（Ｐ＜０．０５由此可以看出，在一定温度范围内，温度越高水葫芦链格孢的侵染率就越高，侵染速度也越快，植株的发病程度也越严重，这说明温度是该菌侵染水葫芦的一个重要因素。表２　温度对水葫芦链格孢致病力的影响温度／℃２０　２５　３０　原生叶片病害严重度３．１４±０．１９ｃ５．３２±０．１８ｂ７．７７±０．１８ａ新生叶片病害严重度０．８４±０．０８ａ０．９４±０．０６ａ１．００±０．０６ａ叶片平均病害严重度２．６４±０．２０ｃ４．３０±０．１９ｂ６．０４±０．１７ａ数据为５次测定的平均值，同列不同字母表示邓肯氏新复极差　注：）检验结果显著（Ｐ＜０．０５用菌株菌丝接种水２．２．２　光照　从图４可以看出，葫芦后，在弱光（条件下，水葫芦链格孢引１２００ｌｘ）　起的原生叶片病害严重度、叶片平均病害严重度和新生叶片病害严重度在第２８天时分别达到９．２９、而强光照（处理的为６８．１７和１．６５，３０００ｌｘ）．５７、　弱光照处理的新５．５１和０．５９。从以上数据可看出，老叶片病害严重度及叶均病害严重度均较对照处理数据为５次试验测定的平均值，不同字母表示）。图５同邓肯氏新复极差检验结果显著（Ｐ＜０．０５（）的严重度级数高，而且差异明显，说明接３０００ｌｘ　种后光照对该病菌的致病性有明显的影响，在一定范围内光照对该菌的侵染有抑制作用。图３　不同ｐＨ值下培养５ｄ后水葫芦链格孢的菌落直径２．１．４　光照对水葫芦链格孢产孢量的影响　不同光照条件下，水葫芦链格孢产孢量明显不同。在黑暗条件下培养，该菌不产生分生孢子；日光灯条件下５培养，其产孢量为１个／皿；而近紫外灯照．３６×１０５射处理的产孢量达到３个／皿，是日光灯照．４４×１０，两处理间差异显著（射处理的２．５３倍，Ｐ＜０．０５）表明光照是影响该菌株产孢量的重要因素，且近紫外光诱导产孢效果明显。２．２　３个主要因子对水葫芦链格孢侵染力的影响菌丝湿质２．２．１　接种温度　用菌株的菌丝悬浮液（量与无菌水１∶１对水葫芦植株涂抹接种，放置００）在２０℃、２５℃、３０℃下培养。第２１天的观察数据表），表２接种后温度对水葫芦链格孢菌丝致病性明（有显著的影响。在２原生叶片病害严重度０～３０℃，随温度升高而增加。３０℃处理的原生叶片的病害严重度显著高于其他２个处理，达到７．７７，２５℃处理的原生叶片病害严重度为５而２．３２，０℃处理的原生叶片病害严重度最低，为３．１４。不同温度下新生叶片病害严重度差异不显著，但总体上也随温度升高而增加。不同温度下叶片平均病害严重度差异显著，３０℃处理的叶片平均病害严重度明显高于其他达到６是２是２２个处理，．０４，０℃的２．２９倍，５℃的１．４倍。图４　不同光照条件下水葫芦黑斑病病情发展趋势不同的保湿时２．２．３　保湿时间　从图５可以看出，间对菌株的致病力影响存在显著差异。将接种的水葫芦植株直接放入光照培养箱，４周后水葫芦链格孢能引起植株轻微发病，叶片平均病害严重度为感病率为４０．６３，０％左右。保湿１２ｈ后再放入培养箱，植株叶片平均病害严重度达到５感４周后，．２１，保湿２叶片平均病害严重度达病率达到９５％；４ｈ，感病率达到１保湿２植株感到５．６３，００％；４ｈ以上，叶片平均病害严重度进一步提高，病率均为１００％，但增长速度较缓慢，保湿４８ｈ的叶片平均病害严重度最高，达到６保湿条件可以促进．５４。由此说明，水葫芦链格孢的菌丝体迅速生长，加快对水葫芦的侵染，保湿时间越长越有利于该菌的侵染。而从发?８０?病速度看，０ｈ到１２ｈ阶段明显快于其他几个阶段，超过２但发病速４ｈ后叶片病害严重度虽略有升高，度缓慢。因此，在实际应用中将保湿时间维持在１２ｈ就可使该菌很好的侵染。水葫芦生长在水域，维持１２ｈ的保湿条件是完全可能的。河南农业科学第４０卷　　　本研究明确了水葫芦链格孢的主要生物学特性和侵染特性，为进一步研究该菌的扩繁发酵技术奠定了基础，对于有效利用该菌也有重要参考价值。然而要在水葫芦防治实践中运用该菌进行生物控制，还需寄主专化性、环境安全性、发酵和制剂对其致病机制、技术等进行系统深入的研究。参考文献：［］朱育菁，林抗美，等．水葫芦的形态特征及药剂１　马丽娜，］，（）：中国农学通报，防除初步试验［Ｊ．２０１０２６８２６８２７１．－［］］吴莉宇．水葫芦防治方法研究进展［热带农２Ｊ．　刘念江，，（）：业科学，２００６２６５６６７０．－［］ａｔｈｏｅｎｓ３ａｒｒｅｔｏＲ　Ｗ，ＥｖａｎｓＨ　Ｃ．ＦｕｎａｌｏｆｓｏｍｅＢｒａ　Ｂ　　　　　　－ｐｇｇｏｔｅｎｔｉａｌｚｉｌｉａｎａｕａｔｉｃｗｅｅｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｕｓｅｉｎｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ　　　　　　　　ｐｑ［Ｃ］ｏｒａｎＶＣ，ＨｏｆｆｍａｎｎＨ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｓｏｆｔｈｅ９ｔｈｉｎ∥Ｍ　　　　　　　－ｇ图５　保湿时间对水葫芦链格孢致病力的影响ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｓｍｏｓｉｕｍｏｎｂｉｏｌｏｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｗｅｅｄｓ．　　　　　　ｙｐｇ：：ＲｏｎｄｅｂｏｓｃｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＣａｅＴｏｗｎ，１９９６１２１１２６．　　－ｙｐ　［］４ａｎｏＫ，ＬａｈｌａｌｉＲ，ＤｉｏｕｒｔｅＭ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｅｒａｔｕｒｅａｎｄ　Ｄ　　　　　　ｇｐｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｏｗｔｈｗａｔｅｒａｃｔｉｖｉｔｏｎｓｏｒｅａｎｄｍｃｅｌｉａｌｏｆ　　　　　　　ｇｇｙｐｙ　ｆｕｎａｌｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌａｅｎｔｓａａｉｎｓｔｗａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈｔｈｒｅｅ　　　　　　ｇｇｇｙ（［］Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｅｓ）Ｊ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏ　　　　－ｐｐｐ，，（）：２０１１１１０２５２１５２８．－ｇｙ［］５ｖａｎｓＨ　Ｃ，ＲｅｅｄｅｒＲ　Ｈ．ＦｕｎｉａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＥｉｃｈｈｏｒｎｉａ　Ｅ　　　　　ｇ（）ｃｒａｓｓｉｅｓｗａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈｉｎｔｈｅｕｅｒａｍａｚｏｎｂａｓｉｎａｎｄ　　　　　　ｙｐｐｐ［／／ｒｏｓｅｃｔｓｆｏｒｔｈｅｉｒｕｓｅｉｎｂｉｏｌｏｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌＣ］ＪｕｌｉｅｎＭ　　　　　　　ｐｐｇＨ，ＨｉｌｌＴＤ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｓｏｆｂｉｏｌｏｉｃａｌａｎｄｉｎｔｅｒａｔｅｄｃｏｎ　　　　　　　－ｇｇｇ，：ｔｒｏｌｏｆｗａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈＥｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｅｓ．Ｃａｎｂｅｒｒａ　　　　ｙｐ，ＡｕｓｔｒａｌｉａｎＣｅｎｔｒｅｆｏｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＲｅｓｅａｒｃｈ　　　　　ｇ：２００１６２７０．－［］］王俊峰，褚建君．水葫芦病原菌的研究进展［杂６Ｊ．　何南，，（）：草科学，２００７１５５９．－［］顾振芳，吴辉辉，等．水葫芦生防炭疽菌（７Ｃｏｌｌｅｔｏ　丁义，－）］的分离与生物学性状［上海交通大学学ｔｒｉｃｈｕｍｓ．Ｊ．ｐｐ，（）：报：农业科学版，２００６２４１１３１９．－［］］褚建君．水葫芦的生物防治［杂草科学，８Ｊ．２００５　丁义，（）：３１５．－［］谭万忠，党连旭．水葫芦杂草上的一种黑斑病鉴９　殷利利，］（）：定记述［杂草科学，Ｊ．２００８２２２２５．－［］１０ｒｅｅｍａｎＴＥ，ＣｈａｒｕｄａｔｔａｎＲ．ＣｅｒｃｏｓｏｒａｒｏｄｍａｎｉｉＣｏｎ　Ｆ　　　　　－ｐ：ｗａａｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌａｅｎｔｆｏｒｗａｔｅｒｈａｃｉｎｔｈ［Ｍ］．Ｇａｉｎｅｓ　　　　　－ｙｇｙ：，ｖｉｌｌｅＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＥｘｅｒｉｍｅｎｔＳｔａｔｉｏｎｓＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＦｏｏｄ　　　　ｇｐ，，：ＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＦｌｏｒｉｄａ１９８４１ａｎｄ　　　－ｇｙ　１８．［］谢振文，曾慕衡．一种蛋白激发子产生菌细极链１１　冯飞，］，格孢菌的生物学特性研究［安徽农业科学，Ｊ．２００９３７（）：９３９６０３９６１．－［］］王生荣．甘肃苜蓿斑点病的初步研究［草地学１２Ｊ．　王婷，，（）：报，２０１０１８３３７２３７７．－３　结论与讨论本研究测定了培养基、温度、酸碱度对水葫芦链格孢菌生长以及光照对产孢量的影响，结果表明，不同培养基对菌落生长影响非常显著，马铃薯蔗糖培养基（上该菌生长最快，菌丝紧密，因此是该真ＰＳＡ）菌的最佳培养基；温度对该菌的影响非常明显，其在１５０℃均可生长，２５℃时生长最快，５ｄ后菌落直～３径为７低温和高温能明显抑制该菌菌丝生长，０ｍｍ，在ｐ５℃和４０℃培养时菌丝停止生长；Ｈ值４．０～菌落均能生长，其适宜的酸碱度范１２．０的范围内，围是ｐ最适ｐ培养５Ｈ值６．５～１０．０，Ｈ值约为９．０，在ｐｄ后菌落直径达到７４．５ｍｍ，Ｈ值４．０和１２．０时菌落生长明显较缓慢；在近紫外光（１２ｈ光／１２ｈ暗）下培养２菌株产孢量是日光灯照射处理０ｄ后，的２所以最适合该菌产孢的光照条件是近紫．５３倍，］１１／。这些结果与冯飞等［外光（对细极１２ｈ光１２ｈ暗）］１２链格孢（和王婷等［对交链格孢（Ａ．ｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ）Ａ．生物学特性研究的结果基本相近，仅在对ａｌｔｅｒｎａｔａ）Ｈ值变化的反应方面存在一定的差异。这可能是菌ｐ而这株在不同的寄主植物上产生不同的寄生适应性，些适应性导致在一些生物学特性上可能显示出一定的差别。温度、湿度和光照对该菌的致病力也有非常显著的影响，适当的高温、高湿和弱光照处理均有利于病菌的侵染，这与许多植物病原真菌的侵染特性一致。因此，如果用水葫芦链格孢在田间接种时，最好选在较湿热天气的傍晚（弱光）喷施菌体溶液，这样有利于侵染发病和提高对杂草的控制效果。包含各类专业文献、专业论文、生活休闲娱乐、高等教育、幼儿教育、小学教育、各类资格考试、中学教育、59水葫芦链格孢生长因子等内容。
　sunshine 不同的植物叶片对水葫芦链格孢 Ae09 菌株生长的影响葛慈斌,刘波,朱育菁,蓝江林(福建省农业科学院生物技术研究所生物农药研究中心,福建 福州 350003) 摘要... 　同时氮磷元素也是水葫芦生长的必需元素, 因此可通过水葫芦的培养达到水体净 化的...链格孢(Alternaria eichhorniae) 【19 ,20】 【16--18 】 ,从 而找到合适...}