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重新安装浏览器，或使用别的浏览器简 便 快速 检测 质 粒
一 可 用于 检测 和 筛 选 的 快 速 法
周建光 于秀琴 马清 钧
军 事 医 学 科 学院 基 袖 医 学 研 究 所
细 菌 常常含 有 染色 体 外小 的 环 状
遗 传 因子
克 隆 的主 要载体
它 可 以 作为 遗传 工 程 中 它 与某 些 细 菌 病 原 性 有
用 接种 环 取 菌 落
用牙 签 的 平 头 或
挑取 一 个大 菌落 加人
例 如 各 种 耐 药性 质 粒
引起 小 儿 腹 泻 和
相 关 的质
微升 灭 菌水 中
成 年 人 旅游 者 腹 泻 的 大 肠 杆 菌 肠 毒 素 质
微升 混 匀
与 金 黄 色葡 萄 球 菌肠 毒素
加染 料 分钟
微升 混 匀 后 在
℃水 浴 中保
牛 腹 泻 痢疾 的
此 时见 菌 悬 液 已 变 粘 稠
面 抗原 质 粒
等 等 因此 无 论 在 遗 传 工 程 技
混 合 器上 充 分 混 合 凝 胶 水 平板 电泳
直接取 样在
还 是 临 床检 验
都需 要 将 质 粒
微 升 灭 菌水
确 定 其 大 小 作 为 进 一 步 的 研 究和 分 析
混 合后 在微 型 离 心 机上 离 心
对 于 简便 快 速检 测 质 粒
些 报导 口 均
的 方法已 有一
签挑去 粘 状 沉 淀 为 醋 酸 缓冲 系 统
取 上 清 电泳
电泳 缓 冲 液
但 有 的 并不 简便
我们应 用菌
澳 化 乙 锭染 色 后 在
落 溶解 物 法
直 接 从 琼 脂 平板 上 挑 取 一 进 行 琼 脂糖 凝 胶
波 长 紫外 灯 下观 察或 摄 影
个 大 菌落 或 少 量 菌 苔裂 解
检 测 的效 果 是 满 意 的
升 溶 解在 毫升
我 们 将 各 自带 有 不 同 分 子 量 质 粒
护 道 尔顿 的大 肠 杆 菌 划 线 接 种 于
将 溶 菌酶 溶 液
按 前 述 方 法 分 离质 粒后 进 行 凝胶 电 图 可见
不 同分 子量 大
缓 冲液 中 核 糖 核 酸 酶 溶 液
小 的 质 粒 均 可 被 分 离检 出 大小 其中
能 显 示 其不 同 的
为单拷 贝质 粒
楚 显 示 其 电泳 区 带
表 明无 论 是 多 拷 贝 还 是
溶液 染料 澳酚兰
混 合 需 新鲜
单 拷 贝 的质 粒 利 用 本 方 法 均 能 被 检 出 粒
也 曾用 本 方 法 检 出 革 兰 氏 阳 性 枯 草杆 菌 质 十 二 烷 基 磺酸 钠
结果也是满意的 图
我们 在 乙 型 肝 炎 病 毒
望塑退鱼遨里里岁 医 学 科 学 院 院 刊 』
重 组 克 隆 工 作 中应 用 本 方 法 检 测 其
按 它 的大 小 对 转 化 子进 行筛选
个 菌落 图
可 见确 能 分 离 和 区
转化 子 质教 大 小的 鉴 定谙选
质拉 转 化 子 的质 粒 大 小相 当 于 粒 大小相 当 于
分大 小不 同的质粒
而 且 可 以 检 出含 有 相 当
分离革 兰氏 阳 性 和 革兰 氏 阴性 细菌质粒 的 电 泳
于重 组 质 粒 大 小 的 克 隆
以 上 结果 表 明
经 过进 一 步 鉴 定
革 兰 氏 阴 性 的 大 肠 杆 菌 质拉
所 得 结 果 与 检 侧 质 粒 的大 小 是 一 致 的
我 们 应 用 的 方 法 有 简便
不需特 殊 设 备 的 优 点
适 用 于 临床 检
也 适 用 于 遗 传 工 程 中重 组 质 粒 的 筛
革 兰 氏 阳 性 细 菌 的 质粒
选 只 要 有 重 组 质 粒 大 小 相等 的 质 粒 标 堆 很 容 易 从 中鉴定 出 重 组 质 粒 本方法应注意
取 菌 细 胞 的量 不 宜 过 多 和
过 多 因细 菌 染 色体
的 背 景反 而 影 响 检 侧 效 果
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