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[期刊论文]
MU JingliWANG YingZHANG ZhifengWANG Juying
以镉为研究对象,在分析我国海水水生生物区系特征的基础上,筛选了栖息我国境内的海水水生生物物种的毒性数据,采用基于物种敏感度分布(SSD)模型不同拟合曲线(log-logistic、log-normal、Gumbel、Weibull和BurrⅢ)的方法分别...
关键词：海水水质基准&&&镉&&&物种敏感度分布&&&风险评价
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[期刊论文]
目的 了解家庭养育环境对早产低出生体质量儿健康相关生活质量的影响,为该群体的家庭健康干预提供理论依据.方法 由1～3岁早产低出生体质量儿(LBW组)以及足月正常出生体质量儿(NBW组)的主要带养人完成家庭养育环境问卷和...
关键词：家庭养育环境&&&健康相关生活质量&&&低出生体质量儿&&&早产儿
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[期刊论文]
LI Jian-zhong
介绍了美国著名科学家J.Craig Venter的科研团队人工合成新物种Mycoplasm Mycoides JVI-syn 1.0 (Synthia)的过程.这个过程包括:对Mycoplasma mycoides(丝状支原体)的两个实验用菌株精确测序,把其中一个作为模板,按照这...
关键词：文特尔(J.Craig Venter)&&&人工生命&&&丝状支原体(Mycoplasma mycoides)&&&山羊支原体(Mycoplasma capricolum)&&&Synthia&&&遗传工程
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[期刊论文]
ZHU Yan-HuiHE Shu-XiangWANG Xiao-ChunHU Zhao-Hui
自1977年第一代Sanger测序法诞生以来，测序技术经历了突飞猛进的发展，第二代和第三代测序技术相继出现。随着测序仪代次的更迭，实现测序目的的技术权重已逐渐由偏重生化反应转向偏重物理学、材料学等非生物学科。Life Tech...
关键词：ion torrent&&&下一代测序&&&基因组测序&&&ion torrent&&&next-generation sequencing&&&genome sequencing
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[期刊论文]
YAO XuenanLIU YueXUE KunFENG XiaoxiaoZHANG ShuixianMA XuLI Junde
DNA条形码作为当代生命科学领域最为活跃的学科之一受到了我国科研工作者的高度重视。以DNA条形码与COI（ cox1）为检索词，在知网与维普数据库对年可获中文文献进行搜集，以数据分析的方式对国内DNA条形码的研究动...
关键词：DNA条形码&&&论文发表&&&研究对象&&&期刊分布&&&DNA barcoding&&&paper presentation&&&research object&&&distribution of periodical
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[期刊论文]
LI YingLIU JiyanHU JiangqinCHEN ZhehaoHU LingzhiWANG Lilin
BIO ORGANS (BIO)是百脉根中调控器官形态及大小的基因.首先改良了矮牵牛愈伤诱导和再生体系,并进一步利用根癌农杆菌介导法定向将BIO及其突变基因bio导入矮牵牛中进行功能研究.结果证实含0.1 mg/L6-BA的MS培养基有利于...
关键词：矮牵牛&&&BIO ORGANS基因(BIO)&&&组织培养&&&遗传转化
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[期刊论文]
WANG WeiYANG HuiWANG ZhengyiCHEN Weiliang
以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1 IA)菌株GD118不同生长时期的总RNA为材料,以18S rRNA作为内参基因,根据实验室抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)已获得的立枯丝核菌基因片段的表达序列...
关键词：水稻纹枯病菌&&&菌核形成&&&实时荧光定量RT-PCR&&&基因差异表达
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[期刊论文]
对生物体在体内生命过程中产生的一系列代谢产物做全面分析将有助于揭示生物基因型和表型之间的联系.代谢组学是应用组学&,包括基因组学、转录组学和蛋白质组学,综合分析代谢产物的方法;通过使用先进的分析技术结合应用新...
关键词：植物&&&代谢组学&&&转录组学&&&数据库&&&应用&&&plants&&&metabolomics&&&transcriptomics&&&database&&&application
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[期刊论文]
ZENG TingHE Zhi-minDUAN Gui-fangZHAO Xiao-yingTANG Dong-yingLIU Xuan-ming
通过酵母双杂交的方法,从拟南芥转录因子库中筛选出了6个与CRY1相互作用的转录因子.为了测定其中的HB22与CRY1相互作用的强度,采用了ONPG与CPRG两种方法对其β-半乳糖苷酶活性进行了分析.结果显示在蓝光光强为50μmol/m2s...
关键词：酵母双杂交&&&CRY1&&&转录因子&&&蓝光响应&&&蛋白质相互作用&&&yeast 2-hybrid analysis&&&CRY1&&&HB22&&&signal transformation of blue light&&&protein-protein interaction
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[期刊论文]
WANG YaLIU JianpingXU MengyunJI WeijieTU JuminZHANG Xiaobo
为研究水稻泛素缀合酶样蛋白的序列特征、基因表达模式及亚细胞定位模式,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),从水稻日本晴中鉴定并分离到1个泛素缀合酶样蛋白基因即OsC...
关键词：水稻&&&亚细胞定位&&&泛素缀合酶样蛋白基因&&&胁迫处理&&&Oryza sativa L.&&&subcellular localization&&&ubiquitin-conjugating enzyme-like gene (OsCROC-1A)&&&stress treatment
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[期刊论文]
WANG PanQI Li-HuaLIU Xue-LinSONG Hong-BinZHANG Chuan-FuZHANG Huai-Yu
microRNA是生物内源性的非编码小RNA，选择性地作用于mRNA的3'非翻译区（UTR），对基因的表达起重要的调控作用。miR-132是发现较早的microRNA之一，我们对其在癌症、感染、心血管疾病、神经系统调节等众多生命过程中的作用进行简...
关键词：miR-132&&&癌症&&&感染&&&心血管疾病&&&神经系统&&&miR-132&&&cancer&&&infection&&&cardiovascular disease&&&nervous system
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[期刊论文]
ZHANG XiongfeiLIU YaliLOU QianQI YinyanDU Lingjuan
基于植物基因工程要求精确调控的目标,为转基因提供更多可供选择的启动子,使用重叠延伸PCR的方法设计并人工构建了2个增强型植物花特异双向启动子pPCHS-35S enhancer-pLCHS和pPCHS-OCS enhancerpLCHS.实验中,用本实验室...
关键词：启动子&&&增强子&&&重叠延伸PCR
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[期刊论文]
ZHU Peng-chengLIU Yi-songHUANG PengZENG Jian-guo
根据前期由本实验室完成的博落回转录组数据设计出65对引物,以浏阳产地的博落回为材料进行筛选,得到了28对有效引物.用这些引物对来自全国4个不同主要产区的博落回进行扩增,共扩增出引物159条带,其中多态性条带121条,占...
关键词：博落回&&&SSR(simple sequence repeat)标记&&&遗传多样性
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[期刊论文]
CUI Dao-leiZHANG Xiao-dongXU Hui-niCHEN Li-meiSHU QunLI Kun-zhi
为探究过表达云南红梨bHLH转录因子对烟草抗盐性的影响,从红梨红色果皮中分离了bHLH转录因子基因PybHLH.亚细胞定位表明PybHLH蛋白定位于细胞核.以转基因PybHLH烟草和野生型烟草为材料,进行了NaCl胁迫对转基因pybHLH烟草...
关键词：PybHLH&&&转基因烟草&&&NaCl胁迫&&&生理特性&&&基因过表达
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[期刊论文]
GAO YanZHOU Xue-hongGAO Wen-junLI Shu-yan
激活转录因子-2(activating transcription factor-2,ATF-2)是碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)蛋白家族中与特定序列相结合的DNA结合蛋白,在调控正常细胞的生长发育、应激反应、DNA损伤应答中发挥作用.ATF-2需...
关键词：激活转录因子-2&&&多重活性&&&肿瘤抑制&&&亚细胞定位
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[期刊论文]
Zhang-yue SONGJing-luan TIANWei-zhe FULin LILing-hong LULian ZHOUZhi-hui SHAN
关键词：Soybean&&&Agrobacterium-mediated transformation&&&Genotypes&&&Stable transgenic efficiency
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[期刊论文]
WANG JiaqingBIAN JiaLI DaizongMA ShuangWANG LiangNA Guangning
从虹鳟鱼（Oncorhynchus mykiss）的脑组织中提取 RNA，经逆转录聚合酶链反应及 cDNA 末端快速扩增技术克隆出 Ndufb2基因全长 cDNA 序列（GenBank 登录号：FJ534641），并对其序列进行分析。扩增结果表明：Ndufb2基因的 cDNA 序...
关键词：虹鳟鱼&&&Ndufb2基因&&&逆转录&&&聚合酶链反应&&&cDNA末端快速扩增&&&rainbow trout&&&Oncorhynchus mykiss&&&Ndufb2 gene&&&reverse transcription-polymerase chain reaction&&&rapid amplification of cDNA ends
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[期刊论文]
LI DanleiLI YuXIE HuiXU ChunlingHuang Xin
为了获得香蕉穿孔线虫的组织蛋白酶B基因,分析该基因的序列、结构及其功能,为进一步研究植物寄生线虫组织蛋白酶的功能及其在线虫防治中的应用提供科学依据.我们应用SMART技术构建了香蕉穿孔线虫cDNA文库;采用SL法,克隆得...
关键词：香蕉穿孔线虫&&&组织蛋白酶B基因&&&基因克隆&&&cDNA文库&&&序列分析
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[期刊论文]
LI LeiYANG Yuan-zhuLIU HongDU Chang-qingLIN Jian-zhongZHU Yong-huaLIU Xuan-ming
利用简并引物和RT-PCR方法从金针菇(Flammulina velutipes)幼嫩子实体中克隆获得Fv GDH全长cDNA序列.构建入门载体pGWC-Fv GDH,利用Gateway克隆技术的LR反应构建原核重组表达载体pDEST17-FvGDH,转化大肠杆菌BL21 (DE3)....
关键词：FvGDH&&&Gateway克隆&&&原核表达&&&SDS-PAGE&&&Western blotting&&&FvGDH&&&Gateway clone&&&prokaryotic expression&&&SDS-PAGE&&&Western blotting
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CAO MinLI Zhi-yingMU Hong-zhenDING Guo-pingWANG Sheng
近年来,多种植物RNA病毒载体被广泛地应用于外源基因的表达、植物病毒学和植物病理学基础理论的研究中.番茄丛矮病毒(Tomato bushy stunt virus,TBSV)是番茄丛矮病毒科(Tombusviridae)番茄丛矮病毒属(Tombusvirus)的典型...
关键词：番茄丛矮病毒&&&复制&&&表达&&&调控&&&表达载体&&&Tomato bushy stunt virus (TBSV)&&&genome replication&&&gene expression&&&regulate and control&&&expression vector
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[期刊论文]
CHENG Xiao-peiXU Bi-yuLIU Ju-huaJIA Cai-hongZHANG Jian-binMIAO Hong-xiaJIN Zhi-qiang
为研究香蕉钙调蛋白基因MaCAM的功能,对香蕉幼苗进行盐、低温和干旱胁迫处理,利用荧光定量PCR技术分析香蕉根中钙调蛋白基因MaCAM在上述不同非生物胁迫条件下的表达特性.盐胁迫处理后MaCAM表达随时间延长为先增加后降低趋...
关键词：香蕉&&&MaCAM&&&非生物胁迫&&&荧光定量PCR
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[期刊论文]
ZHANG Song-jiangGAO Jian-feng
MTT法和荧光分光光度计检测发现β淀粉样蛋白膜内片段(intramembranous fragments of amyloid-β,IF-Aβ)可以抑制β淀粉样蛋白42(amyloid-β,Aβ42)对体外培养神经元的毒性.通过体外检测IF-Aβ对淀粉样前体蛋白(amyloid precu...
关键词：阿尔茨海默病&&&β淀粉样蛋白膜内片段&&&淀粉样前体蛋白&&&表达&&&Alzheimer's disease&&&intramembranous fragments of amyloid-β&&&amyloid precursor protein&&&expression
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[期刊论文]
LIU WeiGONG ManCHEN Shu-yuanLIANG Jie-jingXU Meng-liang
OrCr3(Oryza rufipogon cold responsive gene 3)是一个从茶陵野生稻中发现的受低温诱导表达的基因.以茶陵野生稻为材料克隆了其cDNA及其启动子区域序列,生物信息学分析表明,该基因的完整ORF (open reading frame)长为1...
关键词：普通野生稻&&&基因克隆&&&逆境&&&生物信息学分析&&&Oryza rufipogon Griff.&&&gene cloning&&&stress&&&in silico analysis
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为了将斑鸠菊( Vernonia galamensis)二酰甘油酰基转移酶基因( V gDGA T1a)导入棉花,创制转基因高油棉花种质,优化建立农杆菌介导的棉花茎尖转化体系,以中棉所49茎尖为外植体,以 H ptⅡ基因为筛选标记, V gDGA T1a为目的...
关键词：棉花&&&茎尖培养&&&农杆菌介导转化&&&斑鸠菊二酰甘油酰基转移酶基因&&&种子含油量&&&Gossypium hirsutum L .&&&shoot tip culture&&&A grobacterium‐mediated transformation&&&V gDGA T1a&&&seed oil content
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[期刊论文]
Wang YanHuang Hui
微小核糖核酸（miRNA）广泛存在于各种动植物及微生物中，参与生物发生、细胞分化和程序性细胞死亡等多种生命进程，是基因表达关键的转录后调控因子。骨组织的发生、分化、增殖和重建与miRNA有着密切的联系。本文就miRNA的发现、...
关键词：微小核糖核酸&&&骨&&&骨重建&&&micro ribonucleicacid&&&bone&&&bone remodeling
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[期刊论文]
gcm(glial cells missing)是调控神经元细胞和神经胶质细胞相互转化的一个基因开关.在gcm功能缺损的突变体中,预期的神经胶质细胞发育成神经元细胞；而在gcm过表达的突变体中,预期的神经元细胞转化为神经胶质细胞.此外,g...
关键词：gcm&&&融合蛋白&&&多克隆抗体&&&gcm&&&fusion protein&&&polyclonal antibody
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[期刊论文]
XIAO Jing-ping
大量肿瘤细胞的有关研究表明,H+、Na+、Ca2+等细胞离子的动态对肿瘤发生起着关键作用.然而,单个离子作为代谢基础的作用是多方面的,其涉癌效果很不一致,有时还是相反的,因此,以控制单个离子动态作为抗癌药物的靶标,其效果...
关键词：肿瘤细胞&&&细胞离子动态&&&抗癌药物&&&cancer cells&&&dynamics of cellular ions&&&anticancer drugs
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[期刊论文]
在果蝇(Drosophila melanogaster的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR...
关键词：Domeless&&&果蝇&&&原核表达&&&多克隆抗体
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[期刊论文]
ZHANG Xiu-liCHEN Ge-feiLIN YingLI JiaMENG Qing
参照GenBank收录的牵引丝蛋白编码序列,经过密码子优化,人工合成3段cDNA序列:NT、CT和4Rep,由Ⅰ型限制性内切酶Bsa Ⅰ和BspM Ⅰ介导无缝拼接,分别构建4RepCT、NT4RepCT、NT8RepCT和NT12RepCT重组模块.通过改造表达载体和优化培...
关键词：4Rep&&&基因克隆&&&融合蛋白&&&原核表达
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Li JieLuan Yu-shiZhai Jun-miaoLiu PingXia Xiu-ying
关键词：tomato&&&miRNA&&&bioinformatics&&&target prediction&&&qRT-PCR&&&stress response
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[期刊论文]
Guan Cui-ping
关键词：compressed amino acid&&&GPCR&&&SVM
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[期刊论文]
转基因技术,顾名思义,其本质就是将一段具有特定功能的基因转入受体生物内,使获得该基因的生物表达这个基因的产物,从而使受体生物具有新的或改良的性状.和其他新兴事物出现早期的情况一样,采用转基因技术生产的转基因食...
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[期刊论文]
查尔酮合成酶( chalcone synthase , CHS)是黄酮类物质合成的第一关键酶.为了获得 CH S基因,我们在ACGM标记所扩增的PCR片段内设计锚定引物,并结合RACE技术首次克隆了柳杉属3种植物的 CH S基因,包括柳杉( Cryptomeria j...
关键词：基因克隆&&&查尔酮合成酶(CHS)&&&柳杉&&&短茸柳杉&&&日本柳杉&&&gene cloning&&&chalcone synthase ( CHS)&&&Cryptomeria j aponica var . sinensis&&&Cryptomeria j aponica cv . Araucarioides&&&Cryptomeria j aponica
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Cloning - Classic LR-Reaction：克隆经典LR反应
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gateway克隆的LR反应很难成功吗
最近在做LR反应，入门载体是pDONR201，表达载体是pHELLSGATE12，做了好几次没有得到阳性克隆，平板（100ug/ml spec)在37培养箱里长出的克隆很小，好像都是杂菌。之前做的BP反应阳性克隆超高的。
具体步骤都是按照说明来的，体系是5ul，入门载体约75ng，表达载体约100ng，TE补至4ul，混匀然后加入1ul LR酶，室温下1小时或过夜反应都试过了，转化前加入0.5ul蛋白酶K，于37度温育10分钟。酶是新买的，分装后就放入-80度了。不知道哪里出问题了:(
我看到有的说明说是最好把表达载体线性化再做LR反应，难道这是LR反应的关键吗？
还有就是用phellsgate12载体的通用引物p27-5和p27-3对空载体进行扩增也扩不出来。。。哎反正诸事不顺啊 suffering。。。
请高手！！
请问这位大师能告诉我pHELLSGATE12和pDONR201一般从哪里买吗
请问大师可否告知pDONR201和pHELLSGATE12一般从哪里获取吗
前者是invitrogen自己的产品，直接购买即可，后者我不确定是商品化载体还是某个实验室自己做的，如果是后者，你可以发邮件到发表相关论文的实验室询问索要。
是美国总公司吗？为什么我联系了在中国的代理，他们说没有呢
可能随gateway试剂盒在卖，让代理查查。另外，现在invitrogen开发的gateway entry vector可能叫pENTR，有B1B2site，抗性有所不同，你可以找找有没合适的。
好的，谢谢
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