怎么判断一个女人是不是爱你！！_百度知道果胶裂解酶（长鲈) 爱尔兰 MKM-E-PLYCJ
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果胶裂解酶（长鲈) 爱尔兰
型号:MKM-E-PLYCJ
外观：乳白色液体
在水中的溶解性：易溶
状态：液体
保质期：在冰箱5年或以上
果胶裂解酶
欧共体4.2.2.2 。从曲霉。 50 ％甘油。具体活动： 19 U / mg蛋白对polygalacturonic酸（ pH值10.8 ， 40 ℃ ） 。污染物： polygalacturonanase ， 000001单位/毫克;内galactanase “ 0.0000003 ü /毫克;内arabinanase ” 0.000001 ü /毫克。稳定在4 ° C的“ 4年。
1 。电泳纯度
-单主要带的SDS -凝胶电泳（兆瓦= 32,000 ） 。
2 。比活度和水平的其他活动
（ U / mg蛋白）
Polygalacturonic酸（果胶裂解酶） 19.5 （ pH值10.8 ） （大写缓冲区） *
Polygalacturonic酸（果胶裂解酶） 5.0 （ pH值8.0 ） （三Bispropane ）
Polygalacturonic酸（果胶裂解酶） 2.2 （ pH值8.0 ） （三HCl缓冲） *
Polygalacturonic酸（内Polygalacturonanase ） 0.000001
Galactazyme片（内Galactanase ） 0.0000003
Arabinazyme片（内Arabinanase ） 0.00001
*在这种酶的活性曾表示将每89毫克的蛋白质。这个
价值是不正确的原因是计算错误。正确的值是表所示。
3 。酶活性
果胶裂解酶测定，在pH 8.0的三羟甲基氨基甲烷- HCl缓冲或三Bispropane缓冲区和
在pH值为8月10日在大写缓冲区，并在40oC与polygalacturonic酸为底物。
活动监测235 nm的录音分光光度计。
内Polygalacturonanase ，内arabinanase和内galactanase在pH值测定
4.5和40oC 。
3 。理化特性
pH值奥普蒂马8月10日。
pH稳定性6.5-11.0 。
温度50 ° C的奥普蒂马
温度稳定性“ 50 °角
一种解决办法的酶蛋白在1毫克/毫升（福林里）有ABS树脂。 1.35为280纳米。
4 。储存条件
酶作为一种解决办法提供了约120单位/毫升（在pH 10.8 ）
在50 ％甘油加0.02 ％叠氮化钠。
商店在4 ° C （或在- 20oC长期） 0.5 。测定果胶裂解酶活力
果胶裂解酶（ Megazyme准备， &#1单位/毫升）稀释在50毫米大写缓冲液（ pH 10.8 ）
载有1毫米氯化钙
2最后酶浓度约为0.07 U / ml的（即
稀释200倍） 。
Polygalacturonic酸（ Megazyme猫。没有。个P - PGACT ）解散了浓度
2.5毫克/毫升在50毫米大写缓冲液（ pH 10.8 ）载有1毫米氯化钙
检测程序：
到1厘米的光路石英试管中加热室的记录
分光光度计，
地址： 1.0毫升polygalacturonic酸（ 2.5毫克/毫升）溶液中大写的缓冲区，以及
1.0毫升的帽子缓冲液（ 50毫米， pH值10.8 ）加1毫米氯化钙
允许以平衡为40oC超过5分钟。
然后添加：
0.5毫升适当稀释酶的解决办法。
组合的解决方案和措施以及吸光度增加235纳米的期间内
准备酶和底物空白，替代这些组件与等量
三/ HCl缓冲，并运行该反应的同时，酶底物的反应。
测量的初步反应速率的线性部分的反应动力学曲线。
活动单位/毫升的原始解决方案：
=多巴胺/药物疗法x 1/4.6 x 2.5/0.5 x稀释。
多巴胺/药物疗法=增长率吸光度在235 nm左右。
4.6 =吸收系数的不饱和键在4-5立场
糖醛酸残基（即e235 = 4.6浓度
-1 x cm - 1处）
2.5 =总量的反应混合物。
0.5 =货量酶用于测定。
稀释=稀释原酶制剂
（例如Megazyme果胶裂解酶地段10801 = 2000 ） 。
活动单位/毫升的原始Megazyme准备（批号10801 ）
= 0.55/10 x 1/4.6 x 2.5/0.5 x 2000年
= 120单位/毫升。
2Assay鉴定果胶
（基于汉森公里， •苏埃森， AB和瑟德贝里和JR （ 2001 ） “酶检测鉴定
果胶及果胶衍生工具的基础上，重组果胶裂解酶“ 。学者AOAC国际， 84 ， 1851 ） 。
三（羟甲基） aminomethane.Trizma基地（西格玛化工有限公司猫。 no.T -8524 ）
氯化钙，二水（默克） 。
缓冲器和试剂：
字母a.三/ HCl缓冲加氯化钙
2 .-溶解六点零五五克的Trizma基地和0.147克氯化钙
二水在900毫升deionised水。调节pH至8.0与1海里盐酸。调节音量，以
1公升。商店4oC 。
湾0.5米氢氧化钠溶解.- 20克氢氧化钠在1升deionised水。
角0.5米盐酸.-添加50毫升的浓度。盐酸（ 10米）到950毫升的deionised水。
4 1海里盐酸.-购买100毫升浓盐酸（ 10米）至900毫升deionised水。
大肠杆菌2丙醇（ 100 ％ ） 。
果胶裂解酶（从Megazyme ，猫没有。电子PECLY ） ：
酶用于这项工作是从原油纯化曲霉。重组preparation.The
果胶裂解酶纯化提供一个单一带的SDS -凝胶电泳和有pH值奥普蒂马10.8 ，但
是用来在pH 8.0在此法。它是提供约14单位/毫升（在pH 8.0的三羟甲基氨基甲烷/盐酸
缓冲区）在解决50 ％的甘油。这种酶的含量，提供的，是稳定在4oC至少2年，
和大于5年， 20oC 。
使用该方法， 0.5mL的酶稀释至50毫升的三/盐酸缓冲液（ pH 8.0 ） 。 （即
100倍稀释） 。这种酶在缓冲储存在适当的等分试样在聚丙烯容器
在- 20oC之间的使用，是稳定的多个冻融周期。
样品制备：
字母a.濡50毫克（ 0.05 g ）的样品0.1毫升的异丙醇。
湾添加50毫升的水，搅拌deionised轻轻的磁搅拌器2小时。
角调整pH值至12日通过仔细增加0.5米氢氧化钠，并留下准确的解决方案
15分钟在室温下。
4较低的pH值为8.0的滴加入0.5米盐酸。
大肠杆菌调整音量，以100毫升水与deionised 。
果胶裂解酶（长鲈) 爱尔兰MKM-E-PLYCJ
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