gfap抗体做WB好跑吗

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【求助】免疫荧光GFAP一抗推荐x
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最近在进行星形胶质细胞与HIF双染,但星胶染出的效果不好,请问可以推荐一下非兔源的用于做免疫荧光的GFAP一抗吗?最好是做过并且效果不错的,急用!谢过!
不知道邀请谁?试试他们
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这两个如何?
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楼上比较靠谱!~ 我觉着我该去三鹰要分儿兼职
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wenshl2005 楼上比较靠谱!~ 我觉着我该去三鹰要分儿兼职觉得三鹰的做组化非特异性染色比较重。。不知道是不是我技术问题。。。wb都能出。。
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caatt 觉得三鹰的做组化非特异性染色比较重。。不知道是不是我技术问题。。。wb都能出。。多设几个浓度梯度。它家的标签抗体我做IF(推荐1:20-1:200)都能用到1:1600. IHC没试过,估计要冲着1:3200去了!
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wenshl2005 多设几个浓度梯度。它家的标签抗体我做IF(推荐1:20-1:200)都能用到1:1600. IHC没试过,估计要冲着1:3200去了!0.0 试过好几个浓度。。之前做的一个核染色感觉不是单纯核染色啊,是核+胞浆。。有其他做同一个抗体的蛋白作对照的另外一个抗体就是只有核被染上。。然后最近做胞浆染色感觉一片淡黄。。没有特异性染色那种深黄色。。。有时候觉得很奇怪。。如果抗体浓度太过造成非特异性染色那么应该特异性染色也会更强也是,就跟做wb那样背景强条带更强。。然而有些抗体做出来就是一片黄。。。这是为什么呢?看过病理科医生做的组化。。天好漂亮怎么能染得那么鲜明?要染核就染核要染浆就染浆要染膜就染膜。。虽然我不是病理的但是平时组化也做得蛮多。。都是课题组师姐教的技术然后自己做的过程中再加些习惯这样。。可是跟专业比起来就是差蛮多。。不知道哪个步骤或者试剂是可以学习一下的。。。
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wenshl2005 多设几个浓度梯度。它家的标签抗体我做IF(推荐1:20-1:200)都能用到1:1600. IHC没试过,估计要冲着1:3200去了!有时候想去公司或者病理科学习一下。。不是想混饭吃而是追求一种美。。有些照片一看就觉得很专业啊。。。0.0
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caatt 0.0 试过好几个浓度。。之前做的一个核染色感觉不是单纯核染色啊,是核+胞浆。。有其他做同一个抗体的蛋白作对照的另外一个抗体就是只有核被染上。。然后最近做胞浆染色感觉一片淡黄。。没有特异性染色那种深黄色。。。有时候觉得很奇怪。。如果抗体浓度太过造成非特异性染色那么应该特异性染色也会更强也是,就跟做wb那样背景强条带更强。。然而有些抗体做出来就是一片黄。。。这是为什么呢?看过病理科医生做的组化。。天好漂亮怎么能染得那么鲜明?要染核就染核要染浆就染浆要染膜就染膜。。虽然我不是病理的但是平时组化也做得蛮多。。都是课题组师姐教的技术然后自己做的过程中再加些习惯这样。。可是跟专业比起来就是差蛮多。。不知道哪个步骤或者试剂是可以学习一下的。。。关于它家抗体疑似非特异性着色的问题,最好咨询楼上冰峰
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wenshl2005 edited on
wenshl2005 关于它家抗体疑似非特异性着色的问题,最好咨询楼上冰峰
在企鹅上咨询过他们家技术。。说我要求太高。。 =。= 做的丑的能上图么。。
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caatt 在企鹅上咨询过他们家技术。。说我要求太高。。 =。= 做的丑的能上图么。。其实,如果wb做出来没背景没杂带的话,基本上就是技术问题或者核浆都有。比如P53,说是在胞核,但染出来胞浆里真心不少。上图呗!~
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Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体
Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体
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生&产&地:中国大陆
访问:27次
发布日期:(更新日期:)
&标准版第 1年
电话:021-
联系人:周经理,阿仪网看到您的。
Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-FAnti-KIF11抗体,驱动蛋白样蛋白1抗体(甲状腺激素受体相互作用蛋白5)、IF、Elisa等,欢迎来电咨询订购,公司竭诚为您提供优质的售前售后服务!
详细内容公司简介
&&Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAP&抗体抗体种属:兔多抗,小鼠单抗浓度:1mg/ml。抗体的相关标记:HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa Fluor 350,Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 555,Alexa Fluor 647Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAP&抗体交叉反应:human,rat,mouse,pig,dog应用:可以用于做石蜡切片免疫组化,冰冻切片免疫组化,Elisa,WB,免疫荧光等实验。(公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗)稀释:1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)2、Immunoprecipitation [1-2 &g per 100-500 &g of total protein(1 ml ofcell lysate)]3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution range 1:50-1:500)4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution range 1:30-1:3000)5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded sections) (starting dilution 1:50 dilution range 1:50-1:500)&Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAP&抗体&&要获得漂亮的Western Blot结果,离不开一株质量优异的抗体。抗体选择有很多需要注意的地方,选择单抗还是多抗,什么种属的,用不用考虑免疫原,价格如何等等。这些在其他地方已经有过比较多的讨论,这里提出这个问题,主要想强调两个经常被忽视的因素:1. 灵敏度/检测限&灵敏度&最初是一个统计学概念,表示样本中检测结果阳性数占所有阳性样品的比例。扩展到各个领域当中就成为各种机器或方法的性能指标,灵敏度越高,越能反应测定值的实际情况。在Western Blot试验中,如果要量化抗体检测的灵敏度就需要一个参数&&抗体检测限。抗体检测限越低,说明会有越少的待测抗原被漏检。因此,对于定性或半定量的Western Blot试验而言,抗体检测限是一个重要指标,抗体检测限低的抗体效能高,使用这样的抗体可以获得更真实的实验结果。所以,选购抗体用作WB实验,在可能的情况下要选择检测限更低的抗体。2. 注意1抗体,阿米洛利结合蛋白1抗体,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa浓度抗体浓度对于商品化抗体的影响有两方面。首先,较高浓度的抗体(&0.5mg/mL)通常性质更稳定,受生产工艺和成本控制等因素影响,不同品牌的抗体的浓度也不相同,所以购买时应注意比较;另外,经验不足的实验者往往被抗体的体积迷惑,然而相同质量下,低浓度的抗体体积更大(例如有的经销商会对抗体进行恶意稀释再转售),所以,计算抗体性价比的时候应该考虑的因素是抗体的质量而非体积。孵育一抗A. 先将需要检测的抗体准备好,并决定好它们的稀释度。B. 配好5%的Milk(TBST溶解),按要求稀释好抗体。注意,如需高比例稀释,最好采用梯度稀释。C. 将稀释好的抗体和膜一起孵育。 一般采用RT 1小时,可根据抗体量和膜上抗原量适当延长或缩短时间。注意:为了便于后面分析结果,我们一般会选用已确定分子量大小而且纯度高的抗体作为marker与一抗同时孵育。洗涤&用 TBST先快速洗三次,把milk尽快的wash掉。然后5mins *5。洗涤是为了洗去一抗与抗原的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。孵育二抗孵育 RT1 小时。 一般采用HRP标记的二抗,稀释比例为1:5000。二抗的稀释比例不能太低,否则容易导致非特异性的结合。注意二抗的选择有多种,要根据一抗来选择抗兔、抗鼠或者抗羊的二抗,以及根据后面的显色条件来选择HRP、AP或者GOD(葡萄糖氧化酶)酶链的二抗或者标志其他探针(如核素等)的。洗涤:用TBST先快速洗三次,把milk尽快的wash掉。 然后5mins *5。洗涤是为了洗去二抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅,所以洗涤一定要干净。公司竭诚为您提供 Anti-GFAP delta抗体,胶质纤维酸性蛋白GFAP&抗体,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa等,欢迎来电咨询订购!&phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)代测厂家磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶&1抗体phospho-AMPK beta 1 (Ser108)代测厂家磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶&1抗体phospho-ALK (Tyr1604)代测厂家磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体phospho-ATM(Ser1981)代测厂家磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体phospho-ATP citrate lyase (Ser455)代测厂家磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体phospho-ATR (Ser428)代测厂家磷酸化ATR抗体AMN1代测厂家细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体ALG11代测厂家天门冬酰胺连接糖基化11抗体ASF1A代测厂家细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体AGPHD1代测厂家氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体ASGPR1代测厂家唾液酸糖蛋白受体1抗体ARSF代测厂家芳香基硫酸酯酶F抗体Anti-NF-H抗体促销高分子量神经丝蛋白抗体Anti-Collagen Ⅱ抗体促销??抗Ⅱ型胶原抗体Anti-NF-M抗体促销中分子量神经丝蛋白抗体Anti-FAM3B/PANDER抗体促销??胰腺衍生因子抗体Anti-HPV16 E7 protein 抗体促销??人乳头瘤病毒16型E7抗体Anti-Tubulin-&?抗体促销?微管蛋白抗体(免疫组化用抗体)Anti-CIDEB 抗体促销??CIDEB抗体Anti-SPAG5/map126抗体促销?抗精子相关抗原5抗体Anti-Smad2/3抗体促销?Smad 2/3抗体Anti-AD7C-NTP/NTP/AF抗体促销神经丝蛋白抗体Anti-Galectin-3??抗体促销半乳糖凝集素-3抗体Anti-Ki-67?抗体促销?Ki-67 Antigen抗体Anti-P63 protein抗体促销P63 肿瘤抑制基因抗体Anti-Spindlin 1/SPIN-2抗体促销?Spindlin 1/SPIN-2 肿瘤形成相关基因抗体Anti-ER-&抗体促销??雌激素受体&Anti-BIRC5抗体促销细胞凋亡抑制因子5抗体Anti-CXorf36 抗体促销?X染色体开放阅读框36抗体Anti-HCV-HCBP1/ACY-3抗体促销??丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白-1抗体Anti-BK channel抗体促销BK通道蛋白抗体Anti-HSP-27抗体促销?热休克蛋白-27抗体Anti-PEDF抗体促销色素上皮源性因子抗体Anti-COX2/Cyclooxygenase 2??抗体促销前列腺素氧化环化酶2抗体Anti-ADAM-TS7抗体促销整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 (N端抗体)Anti- KGF/FGF-7抗体促销?角质形成细胞生长因子/纤维母细胞生长因子-7抗体Anti-FGF-8/HBGF-8 抗体促销??成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8抗体Anti-CD56/NCAM1抗体促销?神经细胞粘附分子1抗体(Elisa IP IHC 用)Anti-HIF-1& 抗体促销?缺氧诱导因子1& 抗体
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Mouse Monoclonal&&Clone:4B2E10
Catalog number: 60190-1-Ig
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ELISA, WB, IHC, IP & &
Published applications
IF, IHC, WB
Publications
5 citations –
Species specificity
Human, Mouse, R other species not tested.
Published Species
human, rat
human brain tissue were subjected to SDS PAGE followed by western blot with 60190-1-Ig(GFAP antibody) at dilution of 1:10000IP Result of anti-GFAP (IP:60190-1-Ig, 5 Detection:60190-1-Ig 1:1000) with mouse brain tissue lysate 2640ug.Immunohistochemistry of paraffin-embedded human brain tissue slide using 60190-1-Ig( GFAP Antibody) at dilution of 1:5000 (under 10x lens). Heat mediated antigen retrieved with Citric acid buffer, pH6.0.Immunohistochemistry of paraffin-embedded human brain tissue slide using 60190-1-Ig( GFAP Antibody) at dilution of 1:5000 (under 40x lens). Heat mediated antigen retrieved with Citric acid buffer, pH6.0.
Positive WB detected inHuman brain,
SH-SY5Y cells, U-251 cellsPositive IP detected inmouse brain tissuePositive IHC detected inhuman brain tissue,
human gliomas tissue, mouse brain tissue, rat brain tissue
Recommended dilutionWB : 1:00IP : 1:500-1:5000IHC : 1:500-1:10000
Application key: WB = Western blotting, IHC = Immunohistochemistry, IF = Immunofluorescence,
IP = Immunoprecipitation
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Immunogen Information
glial fibrillary acidic protein
Calculated molecular
432aa,50 kDa
Observed molecular
GenBank accession
Gene ID (NCBI)
Gene symbol
FLJ45472, GFAP
BackgroundGFAP (Glial fibrillary acidic protein ), an intermediate-filament (IF) protein , is specifically expressed in cells of astroglial lineage and is widely used to mark the astroglia in the brain. It is
also used as a marker for intracranial and intraspinal tumors arising from astrocytes.
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