基显(MONSTAX)_再一步(One More Step) - &她很漂亮&OST Part.3_mv_热播网
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基显(MONSTAX):再一步(One More Step) - &她很漂亮&OST Part.3
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&#183;&#160;&#160;以10倍稀释,标准曲线CT值相差&3,扩增效率&100％，怪了?(扩增效率,标准曲线,绝对定量,探针) - PCR实验 - 生物秀
标题: 以10倍稀释,标准曲线CT值相差&3,扩增效率&100％，怪了?(扩增效率,标准曲线,绝对定量,探针)
摘要: [以10倍稀释,标准曲线CT值相差&3,扩增效率&100％，怪了?(扩增效率,标准曲线,绝对定量,探针)] 我作绝对定量，用探针法，质粒倍比稀释，标准曲线还过的去，就是扩增效率大于100％，，请大家指正。附图1 关键词:[扩增效率 标准曲线 绝对定量 探针 质粒]……
我作绝对定量，用探针法，质粒倍比稀释，标准曲线还过的去，就是扩增效率大于100％，，请大家指正。附图1
图2标准曲线图图3扩增效率图图3扩增效率图在理论上，PCR的扩增效率是100%，即以2的指数扩增，稀释倍数为10倍时，至少要见间隔3.3个循环，即2的3.3次方=10，小于这个值在理论上不对，不知道为什么楼上的曲线为什么间隔小于3.3，这样效率就&100%了。
楼上的倍比稀释应该很准确，没问题这种事情是时有发生的。理论上以十倍浓度梯度稀释Ct制应该相差3.3，但实际上操作起来，人为稀释可能带来误差。另外，像阈值的选择是手动还是自动，都有可能使Ct值变化。最后，软件计算的Slope也只是计算而已，也会带来误差。像你的10-4和10-5间的间隔就有近4个循环。总的来说，结果不错1，减少标准曲线的点。5个点就够了，只要目的基因的拷贝在这些点的范围内就可以。2，第一点的浓度太高了。15cycle后出现信号比较好，而且目的基因一般没有那么多的拷贝，可以考虑更高的稀释比作为开始。我用过200ng的质粒，稀释10，000倍后作为第一个点3，每个点测量3次。我每次用15个孔来确定标准曲线，5个点，每个三次，可以达到稳定可重复的结果。4，改变Threshold，可以得到更好的结果。
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电话：021-↖一个NB的微信 不仅仅是公交春天是去渔山岛最好的季节，这个时候岛上野花正密密盛开。正是面朝大海，春暖花开！乐行族安排乘快艇前往渔山岛，更为快捷方便，不怕晕船。北渔山灯塔为渔山岛的标志，有“远东第一大灯塔”之美誉。&仙人桥“自然形成的拱形桥，不得不佩服大自然的鬼斧神工这是一个拍写真的好地方。五虎礁:伏虎礁、尖虎礁、高虎礁（岛）、平虎礁、老虎屎礁岛上到处都是肉肉，拣到手酸抓海胆、拣螺、是我们乐行族必备的活动。一起期待从海平面升起的那第一缕阳光！乐行族在这里留下不一样的回忆！【渔山岛简介】渔山岛位于距石浦港东南47.5公里的洋面上，陆地总面积2.3平方公里，分北渔山、南渔山、五虎礁三群岛。这里碧海奇礁，风光优美，海水透明度达10米以上，站在礁岩上可看到各种鱼类在水中畅游。海澡类、贝壳类沿岩布列，特别是矗立于悬崖之巅的国际灯塔，庄严的国境碑，波涛汹涌的仙人桥，雄伟多姿的五虎礁，绝壁千纫的悬崖，崖边蔓延开着黄花的仙人掌，金光万道的日出，情趣怡然的采捕更具魅力。【活动亮点】五一不想人挤人就去这宁静的渔山岛。1、渔山岛是国家级的海洋生态保护区，在浙江要去看蔚蓝的大海，去渔山岛吧！岛上旅游半开发，相对舟山一带，人少多了。渔山岛风景迷人，5月里，海岛野花浪漫。同时，渔山岛也是海钓的天堂。2、乐行族特别安排快艇出海，从石浦码头出发仅需1.5小时（慢船要2.5小时），方便快捷，条件更舒适，可以有更多的游玩时间！但船费用比慢船要贵几十元。【活动策划】乐行族户外拓展策划有限公司(承接团队出游、拓展)【活动时间】5月2日-3日【活动地点】象山石浦-渔山岛【活动内容】海钓、捡海胆、捡螺、（幸运的话还可以徒手抓到保罗）、篝火晚会、谈人生、赏夜景、看日出、环岛游。【风景指数】★★★★★【活动难度】★☆☆☆☆（休闲）【活动强度】★☆☆☆☆（休闲）【集合时间】7:00——7:30江东雅戈尔体育馆门口集合，请在集合点提前10分钟到，切勿迟到，影响行程。【活动报名】报名请联系GreenQQ号：电话：微信：Green372233活动群: （已经在乐行族群就要不用再加了）【活动费用】成人660元/人，1.2米以下500元/人【活动备注】车上座位号将按报名顺序安排---------------------------------------------------------用费包含1、全程车费（有运营证的正规旅游车）2、石浦-渔山岛 快艇来回船票3、旅游意外险30万4、组织成本费、公共物资、活动道具等5、领队和司机通讯食宿补贴【费用不包含】1、岛上的个人消费：海鲜餐800一桌，海鲜面25元/碗2、住宿：渔家宾馆，130元/床（2-3人间）如需安排请提前预定；露营，80-100岛上有租赁，露营洗涮需交10元左右的水费。【住宿和用餐安排】1、住宿渔家宾馆可帮助代订（但需提前预定）2-3人间130元/床；岛上扎营还是比较舒服的，有草地、很凉爽，抵得上海景房。大家可自由选择2、全部餐饮酒水，渔山岛离大陆远，所以较贵，大家多带一些好吃的上去，炉头套锅方便面，还有水果。如果要吃渔家乐，领队也会推荐量大优惠的餐店给大家，费用AA。【福利】：1、首次参加活动成员赠送乐行族首批纪念徽章及魔术巾2、评分即可10元代金劵代金劵：1.只有用微信评分的用户，可以得到代金券2.代金券只限本人下一次活动车上现场返还，一次只能使用一张此福利由技术支持团队提供（对于用户参与微信功能测试的奖励）-----------------------------------------------------------报名以打款为准：【支付宝转账】支付宝账号
泮惠敏（推荐方式，最方便快捷）【银行转账】工商银行账号 00
兴宁东城支行 泮惠敏 公司账号 4 14189 宁波银行东门支行宁波乐行族户外拓展策划有限公司付款时请备注网名+人数+活动，如“鱼骨+1人+渔山岛”打完款把姓名+身份证号+联系方式给green买旅行险用,并告知上车地点注:请您安排好时间，确定有空出行再进行打款。如果临时有事，请找人顶替;如果没有顶替人员报名款项将按下方协议来进行退.款，如遇7级以上风力、大雾、台风等导致航班停航情况，会提前通知大家，活动会取消退全款，其他情况活动都会照常进行。---------------------------------------------------------------【出团通知】1 尽量提前完成名单统计，并在活动前一天最晚20点之前短信发送车牌号及领队电话（群发短信信息有延迟现象；另外不少智能手机有短信屏蔽功能，请及时到垃圾箱找寻）。如果没有收到，也请您放心，活动照常，请到集合地准时集合就行。2 临时报名的队员，可能没有短信出团通知，只要报名成功，准时来集合地集合即可。-----------------------------------------------------------【具体行程】第一天早晨江东体育馆集合，签到。7:30准时出发。领队沿途安排大家互动介绍，一路欢声笑语。约2小时后抵达石浦，在码头上游轮快艇，凭海临风，渐渐告别大陆，我们行使在浩瀚的海洋上，海鸥在追逐我们，约1.5小时到达渔山岛。第一感觉，海水真蓝，还有巨大的水母在海中。上码头，我们安排好住宿和营地后，开始环岛漫步，面朝大海，春暖花开。我们欣赏无敌海景，看五虎礁惊涛拍岸；登远东第一大灯塔，看海天一色；过天生桥，看天地奇观；到渔村闲逛，看渔家生活。夜里，点上手电头灯，我们开始快乐的海滨激情晚会，我们燃放电火花，升起孔明灯（视天气和海岛规定而定）；真情告白也好，趣味故事也罢，杀人游戏也行，来海岛要的就是自由的时光~但夜里不要轻易抬头，否则那密密麻麻壮观的银河星系，会使你嘴巴张大合不拢，哈哈！用餐：中餐自带干粮或渔家乐聚餐AA（乐行族信誉保证，所有餐费均不会收受回扣，乐行族不但让大家玩的好，还让大家吃的好！）住宿：岛上渔家宾馆待订床位或者露营第二天清晨5点多，因靠近东面，太阳就早早来看我们了，精神好的朋友可以起来坐在岩石上，看着太阳在海里慢慢的升起；今天可以自由活动，或者跟着领队去海边礁石滩，摸海螺，捉螃蟹，尽享海边的快乐。想海钓的朋友，渔山岛的鱼类资源可丰富了，这里是我国家东海最佳海钓基地。海钓兵器可自带（岛上30元一天）。先把帐篷整理好，早上10:40启程去码头，11:30坐快艇回石浦，13:00分到达石浦，如需一起就餐请在前一天晚上跟领队说，50元一人石浦吃海鲜中餐AA，也可自备干粮。13：40适时坐大巴回去，15点左右抵达宁波，大家依依不舍含泪吻别！！回来之后欢迎上传你拍的美图上传到群相册，与大家一起分享！【个人装备】女生建议穿裙子，与岛上的野花来一个亲密合影，美哒哒！背包，装自己所需的食物和生活用品（防雨用具，泳衣，换洗衣物，防蚊水）露营用品（帐篷睡袋、防潮垫、灯具等）防晒用品，可以是防晒霜，防晒风衣，帽子、驱蚊水。---------------------------------------------------------------报名提醒： （此协议等同于旅游合同，付款成功即您已同意此协议。）1.乐行族的线路大多是商业化不浓，贴近原生态的的。所以部分线路硬件设施不足。请带好一颗旅行者的心，宽容面对旅行中的一切。放下一切负担的参与到每一次开心的大笑中吧！2.国内游活动凡是报名付款后，要退出活动的，按照下列标准向旅行社支付业务损失费：出发前10天及以上（以活动集合日日期为准），需支付旅游费用总额的1%；出发前9日至8日，支付旅游费用总额的10%,出发前7日至4日，支付旅游费用总额40%；出发前3日至1日，支付旅游费用总额70%；出发当日，支付旅游费用总额80%。如按上述比例支付的业务损失费不足以赔偿旅行社的实际损失，旅游者应当按实际损失对旅行社予以赔偿，但最高额不应超过旅游费用总额。旅行社在扣除上述业务损失费后，应当在旅游者退-团通知到达日起3-5个工作日内向旅游者退还剩余旅游费用。3.旅游者未按约定时间到达约定集合地点，也未能在出发途中加入旅游团队的，视为旅游者在出发当日单方面解除合同，不予以退款。4.在户外活动中为了方便就餐如安排农家AA聚餐，请放心，乐行族执行的是严格的无回扣制度，不但让大家玩的好，更让大家吃的好！举报电话：5.根据旅游法相关规定，不接受未成年人单独报名参加活动；未满18周岁需由监护人带领，并全程由监护人负责照顾。6.向旅游者提供的旅游服务信息必须真实、准确，不得作虚假宣传，误导旅游者。对旅游者的个人信息，应当予以保密。7.组织方未与旅游者协商一致或者未经旅游者要求，指定购物场所、安排旅游者参加另行付费项目，以及组织方的导游、领队强迫或者变相强迫旅游者购物、参加另行付费项目的，旅游者有权拒绝，也可以在旅游行程结束后 30 日内，要求组织方为其办理退货并先行垫付退货货款、退还另行付费旅游项目的费用。8.如有传染性疾病、心脑血管疾病、严重呼吸系统疾病、精神病、严重贫血者、大中型手术恢复期患者、行动不便者、孕妇等不适宜出行者请勿报名。出发前请咨询医生、凡隐瞒自己疾病产生严重后果的，一切责任自负。9.为保证活动质量和安全，乐行族大巴游和自驾游一般情况下不进行混搭，大巴不能超载；因为乐行族多为户外、摄影和深度游线路，操作比较复杂，如活动遇上不可抗力的因素或者旅行社、履行辅助人已尽合理注意义务仍不能避免的事件，影响旅游-行程的，按照《旅游合同》第九条，合同的变更条例执行。10.因交通延阻、罢工、天气、飞机火车故障、航班取消或更改时间等不可抗力原因所引致的额外费用，由游客承担。如果因为不可抗力导致活动取消，活动费用将会在3-10个工作日退还到相应账户11.如需中途离团，离队前则需签署书面的离队脱团协议，离队后的一切安全责任和费用均由个人自行承担。12.出游过程中，如产生退费情况，以退费项目旅行社折扣价为依据，均不以挂牌价为准。13.因旅游者自身原因（如违法犯罪行为、过失行为、行为判断失误、疾病、自甘风险参加某些旅游项目等）、不可抗力或者旅行社、履行辅助人已尽合理注意义务仍不能避免的事件，导致旅游合同无法履行或者旅游者人身、财产权益受到损害的，组织方不承担赔偿责任，但应当协助处理，因此支出的合理费用由旅游者承担。14.组织方就旅游活动中可能危及旅游者人身、财产安全的情形已向旅游者作出明确的告知或警示，且事后履行了必要的救助义务，组织方不承担赔偿责任。15.由于公共交通经营者的原因造成旅游者人身损害、财产损失的，由公共交通经营者依法承担赔偿责任，组织方应当协助旅游者向公共交通经营者索赔。16.所提供的服务应当符合保障旅游者人身、财产安全的要求。对可能危及旅游者人身、财产安全的事项和须注意的问题，向旅游者做出真实的说明和明确的警示，并采取合理必要措施防止危害发生。17.突发事件或者旅游安全事故发生后，旅行社应当立即采取必要的救助和处置措施，依法履行报告义务，并对旅游者作出妥善安排。18.关于保险：乐行族给大家投保的险种为太平洋之旅旅游意外险，最高保额为30万，国内游活动保险从上车开始到活动结束返程下车为止（活动返程中途下车的游侠保险截止到下车为止）。国内长线活动保险从集合日开始到活动结束日为止；19.关于住宿：如两人或以上的报名，需在报名时备注栏内注明住宿需求，如“一起住”、“分开住”等。如单人报名要求住一个房间的，需致电客服确认是否能安排，单房差自理。如出现单男单女，尽量安排该客人与其他同性别团友拼房；如不愿拼房或未能拼房，请补齐单房差以享用单人房间,需在报名时备注栏内备注清楚。如出现多人间(如3人间、4人间等)需遵循工作人员安排。图文内容由 乐行族 提供茶几：天气热起来了，渔山岛的经典线路，今年应该还是火爆继续...便民进行到底 我为人人 人人为大家◎20万+用户 宁波最大微信公众◎生活 · 资讯 · 服务 合作交流请联系 - QQ: （茶几）
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