gp2-hek293细胞是什么细胞状态不好怎么办

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关键词:GP2-293细胞【简介】公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类上万种产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。【详细说明】上海拜力生物提供一系列的标准、新颖、独特的生化试剂,所有这些产品均具有极高的纯度和高超的品质。完善的库存及供应体系以及高效稳定的专利纯化技术,保证产品均能现货供应和产品质量的稳定性GP2-293细胞中国试剂网 /goodsid/fenleiyi/.html提供上万种实验耗材及器材,详细的规格参数,放心的价格,让您一站式采购。主要产品有:主要产品:1、血清:Gibco(/goodsid/fenleiyi/3204179_gibco/1.html)血清,Hyclone(/goodsid/fenleiyi/3200092_hyclone/1.html)血清2、移液器:艾本德eppendorf移液器,吉尔森Gilson移液器,普兰德Brand(/goodsid/fenleiyi/3204182_brand/1.html)移液器,大龙Dragonmed移液器,热电Thermo移液器,VITLAB移液器,立洋Nichiryo移液器,和肽Hotide移液器,Drummond移液器,百得Biohit移液器,瑞宁RAININ移液器,Labnet移液器,HTL移液器,Socorex移液器3、ELISA试剂盒:人elisa试剂盒、大鼠elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、豚鼠elisa试剂盒、猪elisa试剂盒、鸡elisa试剂盒、鸭elisa试剂盒、鱼elisa试剂盒、兔elisa试剂盒、猴elisa试剂盒、马elisa试剂盒、牛elisa试剂盒、山羊elisa试剂盒、绵羊elisa试剂盒、骆驼elisa试剂盒、植物elisa试剂盒、其他试剂盒4、实验技术服务:荧光定量pcr服务、hplc(高效液相色谱法检测)服务、emsa(凝胶迁移或电泳迁移率实验)、酶联免疫(elisa)实验技术服务、免疫组化(ihc)技术服务、rna干扰(sirna,miran)、双向电泳、免疫共沉淀、科研整体实验外包服务、流式细胞检测服务、细胞培养技术服务、四甲基偶氮唑盐比色法(mtt方法、sci生物医学论文服务、荧光原位杂交fish服务、载体构建实验技术服务、抑制性消减杂交(ssh)技术服务、单核苷酸多态性分析(snp)检测服务、real-time pcr实验技术服务、westernGP2-293细胞5、细胞培养:ATCC(/goodsid/fenleiyi/3204548_atcc/1.html)细胞6、抗体定制:abcam(/goodsid/fenleiyi/3200090_abcam/1.html)抗体GP2-293细胞拜力生物实验试剂的有点:& & &ELSIA试剂盒:上万种进口品牌ELSIA试剂盒凭借着它完美的标曲、严格的质管、较高的稳定性,深受科研者的支持与青睐。& & &抗体:我们的抗体对天然蛋白的亲和力、特异性更优,识别位点更多,应用范围广,亲和层析纯、纯度较高。& & &实验室耗材:提供上万种实验耗材及器材,详细的规格参数,价格合理,质量保真!& & &培养基:是实验室健康安全首选培养基,质量严格控制、无粉尘吸入、质量稳定、瓶装和袋装二种包装方式,迅速安全的运输。GP2-293细胞备注:本公司试剂盒仅供科研,不得用于临床拜力实际支持:& 拜力生物经过不断的实验实践和改进,积累了大量的经验,拥有专业的技术研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒,能对血清及其它样本定量检测抗原,定性检测特异性抗体。优质的试剂,先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。拜力进口ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有相当好的优势。GP2-293细胞代理品牌:/dlpp/& & 上海拜力生物科技有限公司具有良好的市场信誉与口碑,我们有一对一的资深的老师对客户进行技术指导,专业的销售和技术服务团队,公司主要销售进口试剂,化学试剂,通用试剂,分析试剂,生物试剂,稀土稀贵试剂,有机试剂,无机试剂,色谱试剂,诊断试剂,实验试剂,检验分析试剂,试剂盒,原装进口Elisa试剂盒等,产品涉及分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗等领域,主要面向全国科研院所、学校、实验室、制药、化工、环境保护及卫生检疫部门等,已经为上千所科研院、学校等数以万计的教授,研究生提供了优质的服务,过硬的产品、合理的价格、优质的服务为不同类型的客户提供最专业的实验室配备解决方案。欢迎来电垂询!
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GP2-293细胞,人胚肾上皮包装细胞
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GP2-293细胞,人胚肾上皮包装细胞细胞生长:贴壁生长或悬浮生长细胞形态:上皮样、多形态细胞样等形态细胞数量:1×1000000个细胞数细胞纯度:93%GP2-293细胞,人胚肾上皮包装细胞活力:87%(Viability by Trypan Blue Exclusion)细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗【细胞培养温馨提示】1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、治疗。2)公司细胞资源中心承诺尽最大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,中心不保证其准确性。3)从文献等处引用的信息本中心未进行核实,仅供参考。4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。GP2-293细胞,人胚肾上皮包装细胞培养的注意事项:玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净,紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;消化液(pH7.8)或其它加入液,应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌,分装成支置-20度保存;培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上,如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。进入操作时应注意先清洗双手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,如果数量较多,培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作,瓶与瓶之间应相隔一定的距离,开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧,打开后应用灯先烧口,然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。&XR-E-07863 小鼠S100酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse S100 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07864 小鼠白介素1(IL-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-1 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07865 小鼠白介素-11(IL-11)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-11 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07866 小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-1β ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07867 小鼠白三烯B4(LTB4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse LTB4 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07868 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse LIFR ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07869 小鼠表皮生长因子(EGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse EGF ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07870 小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse iFABP ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07871 小鼠端粒酶(telomerase)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse telomerase ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07872 小鼠肌钙蛋白-T(Tn-T)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Tn-T ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07873 小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-5 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07874 小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-4 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07875 小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-9 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07876 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TIMP-1 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07877 小鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse bFGF ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07878 小鼠巨噬细胞炎症蛋白-5(MIP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MIP-5 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07879 小鼠可溶性E-选择素(sE-selectin[CD-62E])酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse sE-selectin[CD-62E] ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07880 小鼠可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse sICAM-1 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07881 小鼠可溶性血管细胞粘附分子(sVCAM-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse sVCAM-1 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07882 小鼠免疫球蛋白A(IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IgA ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07883 小鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IgE ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07884 小鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IgG ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07885 小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IgM ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07886 小鼠内皮抑素(Endostatin)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Endostatin ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07887 小鼠脑钠素(BNP)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse BNP ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07888 小鼠皮质酮(Corticoserone)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Corticoserone ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07889 小鼠前列腺素E2(PGE2)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PGE2 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07890 小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse NSE ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07891 小鼠神经营养素3(NT-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse NT-3 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07892 小鼠神经营养素4(NT-4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse NT-4 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07893 小鼠细胞间粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse ICAM-2/sCD102 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07894 小鼠细胞间粘附分子-3(ICAM-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse ICAM-3 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07895 小鼠纤溶酶原激活剂抑制因子1(PAI-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PAI-1 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07896 小鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PAI ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07897 小鼠纤维蛋白原降解产物(FDP)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse FDP ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07898 小鼠血栓调节蛋白(TM)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse thrombomodulin ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07899 小鼠血小板衍化生长因子(PDGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PDGF ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07900 小鼠B细胞活化因子受体(BAFF-R)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse BAFF-R ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07901 小鼠B细胞活化因子(BAFF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse BAFF ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07902 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse OxLDL ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07903 小鼠III型前胶原氨基端肽(PIIINT)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PIIINT ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07904 小鼠III型胶原(Collagen)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Collagen Type III ELISA KIT ,规格: 96T/48TXR-E-07905 小鼠Agouti相关蛋白(AGRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse AGRP ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07906 小鼠C反应蛋白(CRP)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse CRP ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07907 小鼠组织因子(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Tissue factor ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07908 小鼠血小板因子4(PF4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Platelet Factor4 ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07909 小鼠结缔组织生长因子(ctgf)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse connective tissue growth factor ELISA Kit ,规格: 96T/48TXR-E-07910 小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-1sRⅠ ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07911 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-1sRⅡ ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07912 小鼠白介素1可溶性受体I(IL-1sRI)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse (IL-1sRI) ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07913 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-1sRⅡ ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07914 小鼠白介素2可溶性受体α链(CD25)(IL-2sRα)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-2sRα ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07915 小鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse IL-2sRβ ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07916 小鼠单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MCP-1 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07917 小鼠单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MCP-2 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07918 小鼠单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MCP-3 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07919 小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-1 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07920 小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-10 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07921 小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-13 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07922 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-7 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07923 小鼠基质金属蛋白酶8(MMP-8)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse MMP-8 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07924 小鼠肽盘生长因子(PLGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse PLGF ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07925 小鼠干细胞因子受体(SCFR)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse SCFR ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07926 小鼠Tie-1酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Tie-1 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07927 小鼠Tie-2酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse Tie-2 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07928 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TIMP-2 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07929 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TIMP-3 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07930 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TIMP-4 ELISA kit ,规格: 96T/48TXR-E-07931 小鼠 TRAIL R1酶联免疫吸附测定试剂盒 ,GP2-293细胞,人胚肾上皮包装细胞英文名: Mouse TRAIL R1 ELISA KIT ,规格: 96T/48TXR-E-07932 小鼠 TRAIL R3酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TRAIL R3 ELISA KIT ,规格: 96T/48TXR-E-07933 小鼠TRAIL酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TRAIL ELISA KIT ,规格: 96T/48TXR-E-07934 小鼠(TRAIL)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: Mouse TRAIL ELISA KIT ,规格: 96T/48TGP2-293细胞0128
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关键字:GP2-293细胞
免疫组化试剂盒 用于体外诊断。试剂盒用于检测与人体组织或细胞标本。GP2-293细胞
免疫组化试剂盒适用范围为冰冻切片和石蜡包埋组织切片,新准备好的淋巴细胞,和固定的培养细胞。GP2-293细胞在1987年 Zymed 公司引入Histostain?-SP 检测试剂盒。
产品详细信息
关键字:GP2-293细胞
免疫组化试剂盒 用于体外诊断。试剂盒用于检测与人体组织或细胞标本。GP2-293细胞
免疫组化试剂盒适用范围为冰冻切片和石蜡包埋组织切片,新准备好的淋巴细胞,和固定的培养细胞。GP2-293细胞在1987年 Zymed 公司引入Histostain?-SP 检测试剂盒。
LAB-SA (也叫做链亲和素-生物素放大体系)被公认为是免疫组化最好的监测方法。LAB-SA的方法学已经在基础研究和平常的试验中广泛应用。
关键字:GP2-293细胞
免疫组化试剂盒6大特点
&1.简易:以简单的一步反应取代常规法的五个步骤。
&2.快捷:以1个小时取代常规法的3-5 个小时。
&3.通用:适合于绝大多数一级抗体,而且不需要二级抗体反应。
&4.灵敏:具有与常规法相似的灵敏度。
&5.重现性好:实验结果重现性好。&
&6.经济:抗体和试剂可重复使用 4-5次。
一、实验原理与意义&
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通
过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新
技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧
光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋
白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。&
二、实验器材&
微波炉、吹风机、组化笔、湿盒、烤箱、振荡器、染缸、光学显微镜、纯木浆卫生纸、
计时器和通风橱等。
关键字:GP2-293细胞
1. & &苏木素复染时间需要摸索,尤其阳性染色也在细胞核上。&
2. & &DAB 显色时间需要达到最优化,镜下观察达到阳性染色明显但背景不太深。&
3. & &抗体孵育时间和抗体浓度需要摸索。尤其一抗孵育最好在 4 度过夜。&
4. & &切片脱蜡和水化要充分;加反应液时要覆盖组织充分;每次加液前甩干洗涤液,但
又防止干片;用组化笔画圈时尽量画大一点,否则墨水排斥液体,引起片周边干片。&
5. & &片子着色不均匀的原因如下:&
① &脱蜡不充分。可以 60 ℃烤 20 min,立即放入新鲜的 xylene1;&
② &水化不全。应经常配制新鲜的梯度乙醇;&
③ &抗体没混匀。用移液器充分混匀一抗/二抗等试剂;&
④ &抗体孵育时,切片放倾斜;&
⑤ &抗体孵育后 PBS 冲洗不充分。&
⑥ &制片厚薄不均匀等问题。染片盒不平,切片倾斜。&
6. & &一抗从 4 ℃拿出后,为什么有人说要 37 度复温,目的是什么?&
① &一方面,防止切片从 4 ℃直接放入 PBS 易脱片; ② &另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有
用,4 ℃和 37 ℃度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后
者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。&
关键字:GP2-293细胞&
免疫组化步骤:
①石蜡涂片脱蜡和水化后, 用PBS (PH714) 冲洗3 次,每次3min。
②根据每一种抗体的要求,
对组织抗原进行相应的修
③每张涂片加50ul3 %过氧化氢溶液, 室温下孵育10min , 以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS 冲洗3 次, 每次3min。
④每张涂片根椐需要加50ul 的第一抗体( 如CD20 , CD3 , CD45RO , CD45RB ,TdT, MPO , CD5 , CD79 , CD56 , CD79a ,CD43 , CD5 , CD10 ) , 室温下孵育60min。
⑤除去PBS 液, 每张涂片加50ul 聚合物( Polymer Enhancer) , 室温下孵育20min , PBS 冲洗3 次, 每次3min。
⑥除去PBS 液, 每张涂片加50ul酶标抗鼠/ 兔聚合物(Polymerized HRP -Anti Ms/ Rb IgG) , 室温下孵育30min。PBS 冲洗3 次, 每次3min。
⑦除去PBS液, 每张涂片加50ul 新鲜配制的DAB或AEC 溶液, 显微镜下观察3~10min。
⑧自来水冲洗, 苏木紫复染, 011 %盐酸分化, 自来水冲洗, PBS 返蓝。
⑨涂片经过梯度酒精脱水干燥, 用DAE 显色, 中性树胶封固。
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细胞冻存和复苏实验原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
  X细胞细胞冻存和复苏实验注意事项:
  1. 从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液。
  2. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。
  3. 冻存和复苏最好用新配制的培养液。
关键字:GP2-293细胞冻存和复苏的原则:慢冻快融
  当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
  如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
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请教一下大家,所说的一次性培养皿具体怎样处理,怎样消毒,好象高压湿热消毒不行。很想能得到您的指教。
& & 先谢了。
&&在有一个问题:我现在在做大鼠气管上皮细胞的原代培养。原代培养的很好,但是再传代时,细胞的生长状态很差。传代时,我没用胶原包被培养6孔板。不知道有那位朋友做过。原代培养的气管上皮细胞能不能传代,传代时一定要用胶原包被吗?
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关于一次性培养皿(塑料制品)再次使用的问题:
1.泡酸过夜;
2.蒸馏水反复冲洗十遍(目的是去处残酸),40度烤干;
3.紫外线等照射30分钟以上便可应用,照射过夜更好。
这只是我的一点经验,我在培养血管内皮细胞和平滑肌细胞时经常这么用没发现污染,细胞贴壁和生长良好。不知对你是否有用。还请大家发表意见。
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DMEM中有谷氨酰胺,为什么还要加呢?是不同厂家的产品,不同的成分吗
我用的DMEM(Hyclone)中有谷氨酰胺,只需每隔两周添加。
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配DMEM时,用盐酸和氢氧化钠调节PH值,行吗?
在配1640时为什么用二氧化碳和氢氧化钠调节?
请指教!!
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Essential protocols for cell culture
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我个人也就的MTT测细胞的增殖才是经济,方便,实用的方法
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Current protocol中SP2/0推荐用90% 胎牛血清(FCS) + 10% DMSO冻存。我们实验室用50% FCS + 40% Medium + 10%DMSO.
Current protocol 还建议细胞进入冻存液后,到真正入-70度冻存这时段不应少于15分钟。并且认为这段时间直接影响以后复苏质量。但一些却认为,细胞入冻存液后,应尽快冻存,你们的看法呢?
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梯度降温,每分钟1度似乎比较理想
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请问哪位朋友有 GP2 293细胞呀? 我这里养的很差,需要大家帮助。
293细胞是不是不是很贴壁?我养别的细胞贴壁很好,而293总有一部分贴的不好。
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细胞培养:RPMI-1640培养基如果标签上已经注明&with L-glutamine&,还要不要添加谷氨酰胺?添加量多少?象这种已含有L-glutamine的1640,其L-glutamine的浓度是多少?
再进一步,一般细胞(肿瘤细胞如S180,B16等)的培养需要谷氨酰胺的浓度应该是多少?}

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