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男80,女50
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哪位大神可以帮我看看这个DNA的杂交温度该是多少
我有两条不是完全互补的单链DNA& &用引物软件分别计算出这两条单链的Tm温度分别为47℃(这个链中间镶嵌有一个核苷酸)&&和&&63℃& &请问下&&我应该在什么条件下杂交& &跪求大婶指教
应该在47℃操作比较好,要不然核苷酸变性了,就坏了 : Originally posted by xie0735 at
应该在47℃操作比较好,要不然核苷酸变性了,就坏了 那应该多长时间比较好呢 如果不确定杂交温度又没有其他特殊限制,最保险的杂交方法是先把溶液升温到95℃加热几分钟然后控制在几个小时内缓慢降温到室温。 : Originally posted by greeneese at
如果不确定杂交温度又没有其他特殊限制,最保险的杂交方法是先把溶液升温到95℃加热几分钟然后控制在几个小时内缓慢降温到室温。 不用考虑DNA的Tm值吗?&&这样不会变性么&&直接加热到95℃ : Originally posted by 一毛钱不包邮 at
不用考虑DNA的Tm值吗?&&这样不会变性么&&直接加热到95℃... 就是要DNA先变性解链,然后让解链后的单链再慢慢的杂交成需要的结构。
这是通过杂交组装复杂的DNA结构的通用做法。用于简单杂交效果只会更好。 : Originally posted by greeneese at
如果不确定杂交温度又没有其他特殊限制,最保险的杂交方法是先把溶液升温到95℃加热几分钟然后控制在几个小时内缓慢降温到室温。 那如果是连到纳米金上的DNA呢?肯定不可能加热到95℃,这时候该怎么办? 杂交温度,可以在49-53度进行杂交,一般都在这个温度范围,但是我也试用过43-46度,杂交的条带会很单一,所以你可以试用一下45度。请各位大神帮忙看看这个乌龟化石是真是假 值多少钱_百度知道
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