骨磨片染色
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【求助】关于破骨细胞TRAP染色问题
【求助】关于破骨细胞TRAP染色问题
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这个帖子发布于2年零301天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位园子里的战友，我做石蜡切片的TRAP染色，标本是小鼠的股骨，用的是Sigma的试剂盒，有几个问题想咨询一下。 1.说明书上写的之前的固定一步还需要做吗？protocol上写了要固定，但是我在石蜡中已经固定好了啊，我不知道还用不用它提供的溶液固定。 2.染色液我用完一天，继续用可以吗？不知道存放有没有什么要求 3.我复染苏木精后，感觉颜色很重，片子全部是紫色，根本看不到橘红色或深红色的阳性细胞，不知道是什么原因？是不是复染时间长了，还是不需要复染？ 4.如何判断是破骨细胞，而不是其他的？急求，谢谢~
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不必再固定。我们不保存染色液。苏木素是染核的，时间不能长1-2分钟即可。染上红的，多核的是mature osteoclasts.
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yesq 不必再固定。我们不保存染色液。苏木素是染核的，时间不能长1-2分钟即可。染上红的，多核的是mature osteoclasts.请教一下，TRAP染色后是用什么显微镜观察呢？可以保存一下，过几天再观察吗？
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光镜。室温干燥条件下都可以保存很久。
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yesq 不必再固定。我们不保存染色液。苏木素是染核的，时间不能长1-2分钟即可。染上红的，多核的是mature osteoclasts.再咨询一下，你们做片子的时候是用说明书上的方法吗？有没有更好的protocol呢？谢谢分享~
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您好，话说石蜡切片需要抗原修复么
关于丁香园|/|/|/|/|/|
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【求助】 怎样用trap特异性染色骨病理切片中的破骨细胞
求助 怎样用trap特异性染色骨病理切片中的破骨细胞TRAP是酸性磷酸梅（ACP）同功酶6种同工酶（0－5）中的第5型，OC含量最为丰富，通常作为鉴别OC的重要标志。TRAP染色结果显示OC胞浆阳性，呈酒红色，核呈阴性。方法与步骤： 孵育液A液：0.2mol/L醋酸缓冲液8ml；B液：六偶氮副品红1ml；C液：取萘酚AS-BI磷酸酯20mg加入1ml N,N-二甲基甲酰胺溶解。将A、B液按比例混匀，调pH至5.0，加入C液再加酒石酸钾钠141mg，充分溶解过滤后配成TRAP孵育液。玻片或骨片上的OC经2.5%戊二醛4℃固定7min后，双蒸水清洗3次，浸入孵育液内，37℃孵育50min， 双蒸水清洗1次，甘油明胶封片，光镜观察。
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